１杀菌剂的抑制作用测定
采用菌丝生长速率法，将供试药剂分别配成含有效成分ｌ０００、５００、１００、５０、１０、５、１和０．５μｇ／ｍＬ的溶液，分别吸取２ｍＬ加入装有１８ｍＬ的ＰＤＡ培养基的三角瓶中，混匀后倒入培养皿中。药剂浓度被稀释为１００、５０、１０、５、ｌ、０．５、０．１和０．０５μｇ／ｍＬ，以无菌水平板为对照，每处理重复６次。将直径５ｍｍ菌苔接种到含药平板上，每皿１块，２５℃恒温箱内培养，６ｄ后用十字交叉法测定各处理菌落直径，计算抑制生长率。抑制生长率（％）＝［（对照菌落直径－处理菌落直径）／（对照菌落直径－菌饼直径）］×１００。通过菌丝生长抑制概率值和药剂浓度对数值之间的线性回归分析，求出各药剂对菌株的有效抑制中浓度（ＥＣ５０值）［５］。试验数据均由ＳＡＳ数据处理工作平台统计分析。
２结果与分析
２．１病原菌生物学特性观察
２．１．１温度和ｐＨ值影响
试验结果看出，在ＰＤＡ培养基上槟榔炭疽菌菌丝生长的温度范围是１０～４０℃，最适生长温度２５～３０℃，低于５℃或高于４０℃均不能正常生长。该菌在１５～３０℃均能产孢，最适产孢温度２５℃，产孢量最多。ｐＨ值４～１１时槟榔炭疽菌在ＰＤＡ培养基上均能生长和产孢，菌丝最适生长ｐＨ值６～７，ｐＨ值大于４的条件适宜产孢，ｐＨ值＝６产孢量最大（见表１）。ｐＨ值对菌丝生长和产孢的影响一致，酸性偏碱的条件适宜病菌的生长和产孢。
２．１．２不同碳源、氮源的影响
试验结果看出，不同碳源培养基上，槟榔炭疽菌菌落生长及产孢量明显不同。７种供试碳源的菌丝生长均优于对照，除Ｄ－半乳糖外，其他碳源的菌落直径均大于对照，说明碳源对槟榔炭疽菌菌丝生长具有促进作用。海藻糖的菌落直径最大，长满整个平板，且菌丝生长旺盛；其次为可溶性淀粉，菌丝生长茂密。碳源对槟榔炭疽菌的产孢量影响差异较大。除可溶性淀粉、Ｄ－果糖、甘露醇的产孢量大于对照外，其他供试碳源的产孢量均低于对照。可溶性淀粉的产孢量最大，Ｄ－果糖次之。８种供试碳源中，可溶性淀粉适合槟榔炭疽菌生长和产孢，可作为槟榔炭疽菌的培养碳源。不同氮源对槟榔炭疽病菌菌落生长及产孢的影响差别较大。以硝酸钾和脲为氮源时，菌落生长最快，菌丝生长旺盛，且产孢量也最大；硝酸钠培养基的菌落生长旺盛，但不产孢。以硫酸铵、氯化铵、硝酸铵为氮源的菌丝生长及产孢均明显受到抑制。在无氮培养基上，菌落直径最大，但菌丝极少，接近透明且不利于产孢（见表２）。
２．２杀菌剂的抑制作用
试验结果看出，６种杀菌剂对槟榔炭疽病菌菌丝生长的抑制作用差异较大（见表３，图１）。咪鲜胺抑制作用最强，其次为苯甲•丙环唑，代森锰锌、十三吗啉的抑制作用较弱，不适用于防治槟榔炭疽病；甲基托布津、多菌灵对槟榔炭疽菌基本上无抑制作用，不能用于防治槟榔炭疽病。
３结论与讨论
试验结果表明，温度对槟榔炭疽菌菌丝生长和产孢影响明显，２０～３０℃最适合菌丝生长和产孢，这与槟榔炭疽菌田间发生规律吻合［１－２］。ｐＨ值４～１１的范围均能生长和产孢；能利用多种碳源，但对氮源要求较严格，硫酸铵、氯化铵和硝酸铵完全抑制槟榔炭疽菌产孢，之前未见相关报道，具体原因有待进一步研究。根据不同氮源对槟榔炭疽菌菌丝生长和产孢的影响差异显著的特性，在生产中可以合理施用氮肥，控制该病害发生［７］。多菌灵和甲基托布津对病原菌的作用机理极为相似，连续使用容易诱致病菌产生抗药性，且两者有正交互抗药性［８］。试验中多菌灵和甲基托布津对槟榔炭疽菌基本上已丧失毒力，推测槟榔炭疽菌对多菌灵和甲基托布津可能已产生抗药性。詹儒林等证实杧果炭疽病菌Ｃ．ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ在我国热区杧果上已形成对多菌灵的高水平抗药性［９］。另外，多种植物上的胶孢炭疽病菌也出现不同程度敏感性降低的情况［１０－１８］，说明多菌灵的抗药性问题已在胶孢炭疽菌的寄主范围内普遍发生。因此，对胶孢炭疽菌的抗药性应给予高度重视，化学与农业论文及早采取相应措施。
作者：余凤玉 朱辉 牛晓庆 唐庆华 宋薇薇 覃伟权 黄山春 单位：中国热带农业科学院椰子研究所
相关专题：肉类研究是核心期刊吗 60只蚊子写作文
