合成色素在食品中的应用非常广泛，不仅能保持食品的色泽，还能促进人们的食欲，但合成色素不具备营养，通常是由煤焦油提炼出的苯胺染料加工完成的，按照我国标准使用合成素色不影响食品安全。高效液相色谱方法是检测食品中合成色素的重要方法，通过检测来控制食品中合成色素的量和种类，保证食品的安全。合成色素的使用合成色素能保持食品的色泽，改善食品的性状，促进人们的食欲，因此现代食品加工中，合成色素的应用非常广泛。食品色素包括天然类的色素和人工合成色素两种，合成色素的成本较低，容易上色且能调成任意颜色，在加工方面非常容易，因此合成色素的使用更普遍。合成色素没有任何营养成分，且存在一定的毒性，可能导致消费者腹泻、癌变等，过量的合成色素危害消费者的身体健康。高效液相色谱检测方法能高效地检测出食品中合成色素的含量以及种类，从而加强对食品中合成色素的规范和管理，保障消费者的权益。目前，国内外对食品中合成色素检测的方法主要有薄层色谱法、离子色谱法、电泳法以及高效液相色谱法等。我国食品中合成色素的标准和规范中，通常以高效液相色谱法作为主要检测方法。但是我国目前以对糖果、果汁以及饮料等食品中的合成色素检测为主，蛋白质含量高的食品以及基质复杂的食品中合成色素难以检测，合成色素与蛋白质结合起来，难以提取和净化，检测的稳定性和准确性较差。随着高效液相色谱法的不断改进，食品中的合成色素检测准确性和精确性也越来越高。
高效液相色谱法
高效液相色谱法（HPLC）是食品合成色素检测的重要方法，我国的多项着色剂检测标准中规定要求使用高效液相色谱法进行测定。高效液相色谱法经过了多年的发展和改进，从最初的饮料、果汁中合成色素的检测，到蛋白质食品中合成色素的检测，该方法的检测准确性和精准性越来越高，在食品中合成色素的检测有着重要的作用。高效液相色谱法采用高压输液系统，将不同性质的溶剂或者不同比例的混合溶剂、缓冲溶液放入到色谱柱中，经过样品分离后，能够借助检测器对样品中合成色素的种类、数量、成分等进行检测，能完成对样品的分析，且操作快速、简洁，选择性以及准确性较高，分离能力也较好，能根据检测的物质性质进行选择。样品提取后，通过色谱柱进行长波扫描，根据波长确定色素的种类和量，完成多种合成色素的测定。食品合成色素的数量和种类越来越复杂，且食品的基质也逐渐复杂，高效液相色谱法难以快速高效的完成色素检测，于是超高效液相色谱法应运而生，它能承受更大的压力、更大的流速，高效地完成食品合成色素的测定。
检测的材料与方法
仪器设备高效液相色谱仪的主要仪器与设备包括紫外检测器、高速离心机、涡旋振荡器、低温冰箱以及24位标准型固相萃取装置等。样品与试剂食品中合成色素检测需要准备好样品材料以及各种检测试剂。首先，要准备无水乙醇、氨水、乙酸铵、甲醇、柠檬酸钠和柠檬酸等分析纯，我国各大试剂公司均有生产和出售。在高效液相色谱检测中，均使用超纯水进行检测，国内外均有销售。色素的准备主要包括胭脂红、赤藓红、诱惑红、柠檬黄、日落黄、亮蓝及靛蓝，我国上海安谱实验科技公司均有生产和出售。聚酰胺固相萃取柱，我国各大试剂公司也有生产出售。溶液的配制合成色素的检测中主要溶液配制包括柠檬酸溶液、柠檬酸钠溶液、乙酸铵溶液以及无水乙醇、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、标准储备液和混合标准使用液。首先，柠檬酸溶液用21.01g柠檬酸混合1L水，充分搅拌；柠檬酸钠溶液选取29.41g柠檬酸钠混合均匀1L水；无水乙醇溶液，70mL无水乙醇、20mL氨水以及10mL水充分混合；标准储备液中选择上述色素各0.1g，放入100mL的容量瓶中，并且加水到100mL；混合标准使用液配制时选用上述溶液2mL，加入到100mL的水中，形成着色剂。检测方法第一，选取食品部分进行匀浆处理；第二，选取5g样品，放置30mL的离心管中，放入10mL无水乙醇与氨水和水的混合溶液中，进行10分钟的超声处理，离心处理10分钟，选取清液沉淀后继续加入无水乙醇混合溶液，一共提取两次；第三，选择提取的清液，在-42℃的条件下分别冷冻0.5小时、1小时、3小时、5小时以及12小时，冷冻后在冷冻离心机中离心5分钟，随后再取清液；第四，将清液取出后进行高温浓缩，将pH值调节到6~7后，可得到浓缩液；第五，通过聚酰胺固相萃取柱进行浓缩液的过滤，采用柠檬酸-柠檬酸钠溶液进行清洗，随后用无水乙醇与氨水混合液进行洗脱优化，将最初的0.3mL流出液处理掉，收集剩余的流出液，在50℃条件下进行氮气浓缩，浓缩到0.8mL以内，并且加入乙酸铵溶液0.2mL，溶解残渣，准备好的液体经过水相微孔滤膜过滤，滤液进行液相色谱测定；第六，色谱条件要进行优化，色谱柱的温度保持在30℃，流动相A相分别是20mmol/L乙酸铵溶液和20mmol/L的乙酸铵和氨水溶液，B为甲醇，进行分离处理后，进行全波长扫描，确定合成色素的波长；第七，制作基质加标曲线，选择5g的空白样品，放入30mL的离心管中，分别加入不同数量的合成着色剂，充分均匀后冷藏，随后重复提取操作处理；最后，选择不含合成色素的虾丸和蟹棒等，制作成浆后，加入标准色素溶液，冷藏后分成6份样品，标准处理后，进行上述同样的操作，样品加标回收率来表示检测的准确度，通过加标浓度的相对标准偏差来表示方法的精密度。
作者：卢蕊 徐晓燕 单位：菏泽市食品药品检验检测中心 青岛市黄岛区检验检测中心
