1资料与方法
1．1资料来源
2012年7月－2013年12月住院育龄妇女泌尿系统标本中分离出的大肠埃希菌共计133株。
1．2细菌的分离与鉴定
将患者标本接种于哥伦比亚血琼脂平板及麦康凯琼脂平板，放置36℃培养箱中培养18～24h，然后按照《全国临床检验标准操作规程》第三版进行病原菌的分离鉴定，同时采用纸片扩散法(K－B法)做体外药敏试验，并以铜绿假单胞菌(ATCC27853)、大肠埃希菌(ATCC25922)作为质控对照菌株。
1．3超广谱
β－内酰胺酶(ESBLs)的检测采用双纸片扩散确证试验，具体操作步骤是，先从哥伦比亚血琼脂平板上选取形态特征一致的待检菌落，用无菌生理盐水配制成0．5麦氏单位的菌悬液，然后用无菌棉拭蘸取菌悬液在M－H琼脂表面均匀涂布接种，待室温下干燥3～5min后，将头孢噻肟(30μg/片)、头孢他啶(30μg/片)、头孢噻肟/克拉维酸(30μg/10μg/片)和头孢他啶/克拉维酸(30μg/10μg/片)4种抗生素纸片贴于琼脂平板上，15min内将琼脂平板倒置放入37℃孵育箱，培养18～24h后，测量药敏纸片抑菌圈的直径，当两种药物中任意一种加克拉维酸与不加克拉维酸的抑菌圈直径相差大于或等于5mm时，可确认为产ESBLs阳性。
1．4试剂
试验中所用的头孢他啶、头孢噻肟等抗生素药敏纸片来源于英国Oxoid公司，M－H琼脂自配，干粉购自杭州天和微生物试验公司。
1．5数据处理
采用WHONET5．6软件进行统计。
2结果
2．1大肠埃希菌的感染情况
2012年7月－2013年12月收治的育龄妇女送检的泌尿系统标本中共分离出病原菌281株，其中大肠埃希菌分离率居首位，占47．3%(133/281)。
2．2大肠埃希菌对抗生素的耐药情况
大肠埃希菌对亚胺培南100．0%敏感，对阿米卡星、呋喃妥因、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率较低，对氨苄西林、哌拉西林、复方新诺明、环丙沙星、头孢呋辛的耐药率较高。
2．3大肠埃希菌产
ESBLs检出率及对抗生素耐药率比较133株大肠埃希菌经双纸片扩散确证试验检出产ESBLs阳性57株，占42．9%。产ESBLs阳性菌株对抗生素的耐药率明显高于ESBLs阴性菌株。
3讨论
泌尿系感染是仅次于呼吸道感染的临床常见感染性疾病之一，可发生于不同性别及各年龄段。女性生殖系统结构的特殊性，使之成为泌尿系感染的高发人群［2］。2012年7月－2013年12月江口县妇幼保健和计划生育服务中心收治的育龄妇女送检的泌尿系标本中分离出的281株病原菌中，大肠埃希菌的分离率居首位(47．3%)，表明大肠埃希菌是育龄妇女泌尿系感染最主要的病原菌，与文献［3］报道相一致。表1的药敏结果显示，大肠埃希菌对氨苄西林、哌拉西林、复方新诺明、环丙沙星、头孢呋辛的耐药率较高，这可能与以上抗生素在临床应用时间较长有关，不宜作为临床经验用药。头孢西丁、头孢吡肟、氨曲南、头孢他啶、妥布霉素及庆大霉素的耐药率在38．3%～67．7%，经验用药需慎重考虑，应以药敏结果为指导。阿米卡星的耐药率低，但其肾脏毒性大，使用受到一定限制，不宜作为常规用药。亚胺培南100．0%敏感，但其使用过程中容易造成双重感染，且价格昂贵，故不宜首选，仅作为重症感染患者的备选药物。哌拉西林/他唑巴坦及呋喃妥因的耐药率较低，临床可优先考虑使用。本资料中大肠埃希菌产ESBLs的检出率为42．9%，低于付维婵［1］等报道贵阳地区58．7%的检出率，但高于郭远瑜［4］等报道浙江萧山地区32．9%的检出率。通过产ESBLs阳性大肠埃希菌及ESBLs阴性菌株对抗生素的耐药结果比较，除亚胺培南、阿米卡星和呋喃妥因外，产ESBLs阳性菌株对其他抗生素的耐药率明显高于ESBLs阴性菌株。产ESBLs阳性大肠埃希菌对青霉素类抗生素(氨苄西林、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦)、头孢类抗生素(头孢呋辛、头孢吡肟、头孢他啶)、单环酰胺类抗生素(氨曲南)出现100．0%耐药。对氨基糖苷类抗生素(庆大霉素、妥布霉素)、喹诺酮类抗生素(环丙沙星)和磺胺类抗生素(复方新诺明)的耐药率也较高。由此表明，ESBLs的产生是导致大肠埃希菌对抗生素广泛耐药的主要原因［5－7］。近年来，随着第3代广谱头孢抗生素的不合理使用及滥用，导致产ESBLs阳性菌株逐年增多，给临床治疗带来很大困难［8，9］。
综上所述，本地区育龄妇女泌尿系统感染大肠埃希菌对常用抗生素耐药严重，临床医生应重视细菌培养及药敏试验，以药敏试验的结果为指导，合理使用抗生素，以减缓耐药菌株的出现。
作者：沈吉成 单位：江口县妇幼保健和计划生育服务中心
