1岗松油仪器与材料
Agilent7890AGC;氢火焰离子化检测器(FID);BS110S型1/10万电子分析天平(梅特勒公司)。无水乙醇为分析纯;α-蒎烯(批号:110897-201302)、β-蒎烯(批号:111827-201202)、柠檬烯(批号:100470-201302)、桉油精(批号:110788-201105)、芳樟醇(批号:1503-200001)、α-松油醇(批号:111859-201102)对照品均购自中国食品药品检定研究院;20批岗松油样品由广西源安堂药业有限公司提供,样品信息见表3,经广西中医药研究院何开家副教授鉴定为桃金娘科植物岗松BaeckeafrutescensL.的枝叶经水蒸气蒸馏提取得到的挥发油。挥发油。
2岗松油方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱为HP-INNOWAX(30m×0.32mm×0.5μm);程序升温:初始温度为80℃,保持18min,以5℃/min的速率升温至140℃,保持20min,以30℃/min的速率升温至200℃,保持15min。分流进样(分流比100∶1);载气为N2;氢火焰离子化检测器(FID);检测器温度:250℃;进样口温度:250℃;进样量2μL。气相色谱图见图1。
2.2对照品溶液制备
分别精密称取α-蒎烯、β-蒎烯、柠檬烯、桉油精、芳樟醇、α-松油醇对照品适量,用无水乙醇制成浓度分别为16.895、8.076、1.556、7.120、6.465、1.125mg/mL混合对照品贮备液。
2.3供试品溶液制备
取岗松油供试品1.0g,精密称定,置25mL量瓶中,用无水乙醇定容至刻度,摇匀,即得。
2.4线性关系考察
分别精密吸取混合对照品贮备液0.5、1.0、2.5、5.0、7.0mL于10mL量瓶中,加无水乙醇稀释至刻度,分别得线性1~5号混合对照品溶液,混合对照品贮备液作为线性6号混合对照品溶液,按“2.1”项下色谱条件测定峰面积。分别重复进样2次,以进样量(μg)为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,计算出线性方程。结果表明6种成分的进样量分别在相应范围内,与峰面积呈良好的线性关系。结果见表1。
2.5精密度试验
取“2.4”项下4号混合对照品溶液,在“2.1”项色谱条件下连续进样6次,分别测定α-蒎烯、β-蒎烯、柠檬烯、桉油精、芳樟醇、α-松油醇的峰面积,RSD分别为0.27%、0.23%、0.19%、0.18%、0.26%、0.42%。结果表明仪器精密度良好。
2.6稳定性试验
精密吸取同一份供试品溶液分别于0、3、5、8、12、24h进样,测定α-蒎烯、β-蒎烯、柠檬烯、桉油精、芳樟醇、α-松油醇的峰面积,RSD分别为0.69%、0.43%、0.33%、0.30%、0.45%、0.74%,结果表明供试液在24h内稳定。
2.7重复性试验
分别精密称取同一批岗松油样品6份,照“2.3”项下方法制备供试品溶液,分别测定α-蒎烯、β-蒎烯、柠檬烯、桉油精、芳樟醇、α-松油醇的峰面积,RSD分别为0.99%、0.63%、0.44%、0.32%、0.44%、0.58%。结果表明本法的重现性较好。
2.8加样回收率试验
取已知含量的同一批岗松油样品6份,分别精密加入混合对照品溶液6.25mL,按“2.3”项下方法制备供试品溶液,进行测定,分别计算各成分的加样回收率,结果见表2。
2.9样品测定
分别取20批岗松油样品,按“2.3”项下方法制备供试品溶液,进行测定,计算各成分含量,结果见表3。各成分的平均含量分别为α-蒎烯15.58%、β-蒎烯4.97%、柠檬烯1.93%、桉油精12.15%、芳樟醇7.76%、α-松油醇2.19%。为更好地控制岗松油的质量,各成分以平均含量下浮20%计,并适当放宽,故暂定限度分别为,α-蒎烯12%、β-蒎烯3.9%、柠檬烯1.5%、桉油精9.7%、芳樟醇6.2%、α-松油醇1.7%。
3讨论
岗松油原质量标准中以桉油精和芳樟醇作为含量指标,并以正十一烷作为内标物,操作方法较复杂,含量指标也相对较单一。由于挥发油成分较多,简单的指标成分不能全面地评价其质量,因此,本实验以α-蒎烯、β-蒎烯、柠檬烯、桉油精、芳樟醇、α-松油醇6种成分作为含量测定指标,并采用外标一点法进行测定手段,结果表明,本方法精密度、重复性及准确度都较高,且方法简单可行,便于操作,较原标准能更全面地对岗松挥发油进行质量控制。
本实验所用岗松油样品多数来源于广西各,由于岗松广泛分布于广西、广东、福建、江西和海南等地,为科学地制定岗松油的含量限度,有必要收集上述各地的岗松油样品,进行测定,以更多的数据来制订其含量限度,科学地制订岗松油的质量控制方法。
作者：李嘉 张赟赟 姜平川 单位广西壮族自治区中医药研究院
