１材料与方法
１．１实验药品 银杏叶提取物：由德国威玛舒培博士药厂授权，台湾济生化学制药厂股份有限公司生产，含量为３．５ｍｇ／ｍＬ。１．２ 照射条件 使用国产Ｘ．Ｓ．Ｓ．２０５（ＦＺ）型固定式Ｘ射线深部治疗机，电压１８０ｋＶ，电流０．５ｍＡ，剂量率为０．２９Ｇｙ／ｍｉｎ，照射剂量为２．０Ｇｙ，１．３ 剂量与分组 微核试验与染色体畸变试验用昆明种小鼠各４０只，分为４组，每组１０只，适应性饲养一周。根据给人用剂量０．５ｍｇ／ｋｇ的标准，根据种属换算关系得到小鼠腹腔注射剂量为５．０ｍｇ／ｋｇ，设此浓度为低浓度，中浓度为１０．０ｍｇ／ｋｇ，高浓度为２０．０ｍｇ／ｋｇ；对照组给予生理盐水腹腔注射。１．４ 微核实验 每天给药１次，连续给药１周。在电离照射前１ｈ给药，照射剂量为２．０Ｇｙ。照射后２４ｈ，脱臼处死动物、剪取胸骨骨髓、涂片、推片、晾干、固定、Ｇｉｅｍｓａ染色，观察１０００个ＰＣＥ计数含有微核的ＰＣＥ数。１．５ 染色体畸变实验 每天给药１次，连续给药１周。在电离照射前１ｈ给药，照射剂量为２．０Ｇｙ。照射后１８ｈ后腹腔注射秋水仙碱４．０ｍｇ／ｋｇ，６ｈ后脱臼处死小鼠。取股骨、生理盐水冲骨髓、低渗、预固定、固定、滴片、Ｇｉｅｍｓａ染色。镜检２００个中期分裂相，记录异常细胞中染色体个数、畸变类型及坐标。１．６统计分析 结果采用ＳＰＳＳ１０．０软件进行χ２检验。
２结果
２．１微核试验各剂量组与对照组比较差异有显著性（Ｐ＜０．０１），说明银杏叶提取物有一定的抗辐射作用。各剂量组组间比较均无统计学意义（Ｐ＞０．０５），说明这三种浓度均有抗辐射能力，但可能达到药效的平台期，呈同等抗辐射能力，见表１。２．２ 染色体畸变分析给药组与对照组比较有显著的统计学意义（Ｐ＜０．０５）。高浓度组在给药组中畸变率最低，生理盐水组最高。低浓度组与各给药组比较有统计学意义（Ｐ＜０．０５），高、中浓度比较无统计学意义（Ｐ＞０．０５），见表２。３ 讨论电离辐射可造成细胞内核酸分子的损伤。辐射的生物学效应的机理是它可以直接作用于ＤＮＡ大分子，又能通过水分子的电离产生自由基，自由基在体内可引起ＤＮＡ损伤［５］、造成单、双链断裂以及碱基损伤、ＤＮＡ分子交联等。骨髓细胞对放射线十分敏感，受到损伤后可在分子水平发生损伤，可以引起染色体畸变、细胞微核增加［６］。染色体是包含遗传信息的核酸分子，而微核是核酸损伤后细胞内的表现形式之一，因此这两项指标可以敏感地反映出电离辐射对核酸分子的损伤作用［７－１１］。本研究表明，银杏叶提取物可降低受照小鼠微核率和染色体畸变率，这可能与银杏叶提取物可以清除体内自由基，拮抗氧化损伤有关。有研究表明，银杏叶提取物在体外和体内均有明确的抗氧化损伤作用，对于糖尿病和心脏疾病动物模型有显著的治疗作用。另外，银杏叶提取物在临床已经广泛使用，主要用于改善血液循环，降低血液粘稠度，改善细胞缺血缺氧状态。循环改善后，对于清除体内自由基有极大的协同作用［１２－１５］。值得注意的是，使用银杏叶提取液腹腔注射后，对小鼠的生存状态未有任何不良影响。动物饮食，活动自如，状态良好。整体状态，给药组明显好于对照组。且未见到明显的毒性表现。因此，本研究认为，可将银杏叶提取物作为辐射高危人群的预防保健用品加以开发应用。
作者：施雨露 刘照轩 陈强 张小楠 徐效义 单位：吉林大学基础医学院病原 吉林大学药学动物医学论文院再生医学系 吉林大学公共卫生学院 吉林大学第一医院
