【摘要】目的：研制剂型更适合治疗口腔溃疡的双层膜药物制剂。方法：通过预试验和L9（33）正交试验，筛选出适宜的口腔溃疡双层膜处方，用匀浆流延成膜法制成双层膜剂并进行相关指标的测定。结果：以2.5%乙基纤维素无水乙醇液作为空白隔离层，1.0%的壳聚糖和2.0%的明胶以1:1配比作为药膜层得到的双层膜剂，外观性状及性能良好，结论：该制备工艺简便、易行，可用作复方龙血竭口腔溃疡双层膜的制备。
【关键词】复方龙血竭；口腔溃疡；双层膜；壳聚糖；明胶
口腔溃疡（recurrentoralulcerROU），中医称为“口疮”是口腔粘膜疾病中的常见病，其发病机理常与病毒、细菌感染，消化系统疾病，精神因素等机体免疫功能失调有关[1]，有学者[2,3]研究发现，此类患者的红细胞及血浆中脂质过氧化酶（LPO）含量降低和超氧化物歧化酶（SOD）活性减弱，从而揭示超氧自由基和脂质过氧化物的作用对细胞的损伤可能是口腔溃疡发病的重要因素之一。复方龙血竭为昆明市中医医院临床经验方，由龙血竭、黄连等组成具有活血镇痛功效，长期应用于临床，疗效显著。基于我们前期对龙血竭降低动物模型的MDA(丙二醛脂质过氧化产物)含量和MPO（过氧化酶）活性，增加SOD的活性及在组织创面修复试验中的研究结果[4,5]，我们将其制备成口腔溃疡膜剂。试验制备的双层膜由药膜层（壳聚糖、明胶）和空白隔离膜层（乙基纤维素）复合而成。该双层膜具有良好的成膜性、生物相容性和可降解性，作为复方龙血竭系列外用制剂的丰富和补充，为医院制剂在贴膜剂方面的创新研究提供了契机。
1材料
1.1仪器HJ-1恒温磁力加热搅拌器（河北红杉试验仪器厂）；DZKW-S-4电热恒温水浴锅（北京市永光明医疗仪器厂）；T1000型电子天平（常熟市双杰测试仪器厂）烧杯、玻璃板若干。1.2试药复方龙血竭药粉（昆明市中医医院自制批号：20150403）；蜂胶口腔膜（北京紫竹药业有限公司批号：24150727）；壳聚糖（国药集团化学试剂有限公司，批号：F20110519）；乙基纤维素（天津市科密欧化学试剂有限公司）；明胶（中国成都金山化工试剂厂）；甘油（湖南尔康制药股份有限公司，批号：000120140905）；冰醋酸，乙醇均为化学纯。
2方法
2.1空白隔离层的制备将乙基纤维素用无水乙醇配制成不同浓度的空白膜成膜液，用匀浆流延成膜法铺制于玻璃板上制成空白隔离膜层，所制膜为白色不透明状，考察其均匀性、柔韧性等，当浓度为2.5％时成膜较理想，所以本试验采用2.5％乙基纤维素乙醇溶液为空白隔离膜层。2.2药膜层成膜的制备以成膜材料壳聚糖的浓度，明胶的浓度以及壳聚糖明胶的配比为因素，设计L9(33)以优化基质配方，得到药膜层的最佳配方。2.3药物双层膜的制备按表2所示浓度及比例，称取壳聚糖于烧杯中，加入1.0%冰醋酸，不断搅拌，使壳聚糖溶胀溶解成透明胶状溶液，备用。称取明胶加入水-甘油（1：1），80℃水浴上不断研磨成透明胶液，趁热加入到壳聚糖溶液中，混合均匀，制成壳聚糖明胶透明胶体混合液，备用。药粉用75%乙醇溶液溶解后与前述胶液体系混匀（每10ml壳聚糖明胶透明胶体混合液加入1mL药物乙醇溶液）后制备药物层成膜液，用匀浆流延成膜法涂铺于空白膜层上，室温晾干制成药物双层膜。2.4评价指标2.4.1黏力测试将完整的双层膜（即空白隔离层和药物层黏合紧密，药物膜不会脱落，成完整的一张膜）放置于15°倾斜板上，药物膜向上，用直径1㎝，重量为5.6g的钢球从距顶端5㎝处自由滚下，记录所用时间。样品评分=该样品滚落的时间/时间最小值。2.4.2粘附时间测试选取已去污、相对平整的新鲜猪大肠若干，剖开，摊平，分别在粘膜上粘贴各试验号膜（完整的药物双层膜裁剪成的1㎝×1㎝的小膜）各三片，挂在37℃、pH为6.2的恒温水浴中，记录各膜剂的粘附时间。样品评分=该样品粘附的时间/时间最小值。2.4.3溶解时间的测试将100mL蒸馏水放在烧杯中置于电磁搅拌器上，37℃恒温水浴，搅拌速度100r/min，将测试膜（完整的药物双层膜裁剪成的1㎝×1㎝的小膜）夹在夹子上放入水浴中并开始计时，记录膜剂破碎或脱落的时间及现象。其中，我们以蜂胶口腔膜（北京紫竹药业）在口腔内溶解的平均时间15分钟作为对照。样品评分=15分钟/该样品溶解的时间。2.4.4综合评价上述三项评价指标的权重比为1:1:1，将各项评分相加后得到每块膜的总评分，得出正交试验结果。由表4和图1可得，壳聚糖浓度的K3值最大；最佳因素水平为壳聚糖浓度1.5%；明胶浓度2.0%；壳聚糖明胶配比为1:1。2.5验证试验取制得双层膜进行黏力测试、体内粘附时间测试（将所制双层膜裁剪成1cm×1cm的小膜，取下粘贴于自愿者口腔颊膜处[6]，记录粘附时间）、溶解时间测试等三项测试得到下表数据；经过体内粘附时间的测试，该双层膜在口腔内没有明显苦味，所以该双层膜的制备能较好的隔离药物膜不受唾液影响，抑制较苦药物在治疗过程中的影响，能被大多数人接受。
3结论
以2.5%乙基纤维素无水乙醇溶液为空白隔离层膜成膜液、以1.0%壳聚糖冰醋酸溶液、2.0%明胶（甘油-水）溶液、壳聚糖明胶配比1：1的混合液为药物层成膜液制成的双层膜，双层膜外观性状良好，药物层呈红棕色半透明，空白隔离层呈白色不透明，外观完整、均匀柔韧、展铺平整。将药物层黏于口腔颊膜处，空白隔离层无黏性，不受唾液影响能有效隔离药物层的苦味，药物能单层释放，双层膜的各项指标显示该贴膜适合口腔内部使用。
4讨论
试验中的药膜层由壳聚糖和明胶组成，其中前者为成膜材料，而明胶为助粘剂，亦可增强膜成型后的韧性。最初的预试验中，我们将壳聚糖和明胶的浓度分别设定为1%、2%、3%和2%、4%、6%的梯度值。之后我们发现药膜溶解时间过长（>2h），鉴于药物的释放与吸收，我们重新调整的浓度梯度，即：梯度A(壳聚糖：0.5%、1.0%、1.5%；明胶：1.0%、2.0%、3.0%)，梯度B（壳聚糖：1.0%、2.0%、3.0%；明胶：0.5%、1.0%、1.5%）。其中低浓度组1:2配比后的样品外观上存在药膜层与空白层分离；梯度B中的大部分样品在溶解时间测试试验中，药膜层与空白层分离脱落后缓慢破碎。考虑到双层膜的特性，我们选择了梯度A的浓度设计。综合试验结果，我们推断药膜层与空白膜层的分离破碎可能与明胶的浓度存在正相关，但该浓度大于2%时有可能会导致药膜层释药时间延长（>2h）。同时，壳聚糖与明胶的配比（体积比1:1→2:1）增大，意味着明胶的的黏附作用减弱，对贴膜的性能也产生一定影响。
参考文献：
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[2]刘言振，燕文海.双层复方白芨口腔贴膜的制备与临床应用[J].中国临床研究，2014,10（4）：17-18.
[3]吕慧英.涂膜剂中成膜材料的研究和应用进展[J].华北国防医药，2009,21（3）：30-32
[4]罗志红等.龙血竭对大鼠撕脱皮瓣的保护作用[J].中国实验方剂学杂志,2010,16（4）:152-154.
[5]石聪.龙血竭凝胶剂的制备及对创面组织的修复作用[J].中药实验方剂学杂志,2015,21（2）:156-160.
矿井机电论文 [6]王斌，钟明康.治疗口腔溃疡的双层膜复方制剂的研制[J].中国药学杂志，2009，2（44）：274-277.
作者：张韶湘 余晓玲 邹昱蕾 单位：昆明市中医医院药剂科
