摘要：目的研究温州市龙湾区６类食品中金黄色葡萄球菌污染状况及产肠毒素特性与耐药性，为防止金黄色葡萄球菌引起的食物中毒及为临床用药提供依据。方法按照《食品微生物学检验》（ＧＢ４７８９１—２０１０）对样品进行金黄色葡萄球菌检测，分离出的菌株用ＰＣＲ法分析肠毒素基因（ＳＥＡ～ＳＥＥ），同时用ＶＩＴＥＫ２Ｃｏｍｐａｃｔ进行药敏试验。结果在５４０份食品样品中分离出金黄色葡萄球菌３１株，检出率为５７４％，其中肉与肉制品和餐饮食品中检出率较高，分别为１１２５％和６８８％。对３１株金黄色葡萄球菌进行肠毒素ＰＣＲ基因检测，检出１２株产肠毒素菌株，占３８７１％；１０株携带ＳＥＡ，其中２株同时携带ＳＥＣ，２株携带ＳＥＢ。３１株金黄色葡萄球菌对氨苄西林、青霉素、红霉素和头孢西丁的耐药率为９０３２％、８７１０％、４８３９％和４８３９％，并表现出多种耐药谱。结论食品中存在金黄色葡萄球菌污染，尤其在肉与肉制品和餐饮食品中较严重；检出产肠毒素金黄色葡萄球菌的比例较高，应引起足够重视；食品中金黄色葡萄球菌对多种药物耐药，临床治疗应选择敏感药物。
关键词：食品；金黄色葡萄球菌；肠毒素耐药性
中图分类号：Ｒ３７８１＋１ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００７－０９３１（２０１６）０４－０４０９－０３
金黄色葡萄球菌是我国食品中常见的食源性致病菌，因其引起的食物中毒事件有较多报道［１－２］。引起金黄色葡萄球菌食物中毒的主要因子为金黄色葡萄球菌肠毒素（Ｓｔａｐｈｙ－ｌｏｃｏｃｃａｌｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎｓＳＥＳ），其中由携带ＳＥＡ、ＳＥＢ、ＳＥＣ、ＳＥＤ和ＳＥＥ肠毒素的金黄色葡萄球菌引起的食物中毒占金黄色葡萄球菌食物中毒的９５％［３］。近年来细菌耐药性的不断增强成为全球关注的食品安全问题，细菌的耐药还可以通过食物链传播［４］。为了解温州市龙湾区食品中金黄色葡萄球菌产生肠毒素情况以及对抗生素耐药性情况，采集５４０份食品进行调查，现将结果报告如下。
１材料与方法
１.１样品来源２０１３年３—１２月从龙湾区５个乡镇（街道）的农贸市场、路边摊点、酒店或饭店、大中型超市和冷饮店等销售的６类食品中采集５４０份样品，其中膨化食品４０份，婴幼儿食品４０份，肉与肉制品１６０份，餐饮食品１６０份，冷饮食品６０份，地方特色食品（鸭舌）８０份。１.２方法食品采样和检测按照《食品微生物学检验》（ＧＢ４７８９１—２０１０）［５］的要求进行。肠毒素检测参照《食品中多种致病菌快速检测方法ＰＣＲ法》（ＳＮ／Ｔ１８６９—２００７）［６］，传统肠毒素Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ和Ｅ５种类型基因单独进行ＰＣＲ检测，各型肠毒素基因检测方法见试剂盒操作说明书。按照ＶＩＴＥＫ２Ｃｏｍｐａｃｔ药敏分析系统进行药敏试验。金黄色葡萄球菌质控菌株（ＣＭＣＣ２６０７９）由中国医学细菌保藏管理中心提供。１.３主要仪器和试剂ＶＥＴＥＫ２Ｃｏｍｐａｃｔ全自动细菌鉴定仪、ＦｒｏＦｌｅｘ普通ＰＣＲ仪、复日ＦＲ－９８生物电泳图像分析系统等；各型肠毒素ＰＣＲ检测试剂盒（上海宝生科技发展有限公司）；药敏ＶＩＴＥＴ２ＡＳＴ－ＧＰ６７ＴｅｓｔＫｉｔ试剂盒（法国生物梅里埃）。培养基和试剂条均经过质量控制合格后使用。
２结果
２.１６类食品金黄色葡萄球菌检出率５４０份样品中检出金黄色葡萄球菌３１株，检出率为５７４％。其中肉与肉制品检出率最高，为１１２５％（１８／１６０）；其次为餐饮食品检出率６８８％（１１／１６０）和地方特色食品（鸭舌）检出率２５０％（２／８０）；膨化食品、婴幼儿食品和冷饮食品均未检出。２.２产肠毒素检出率与分型情况对３１株金黄色葡萄球菌进行ＰＣＲ肠毒素检测，检出１２株产肠毒素菌株，检出率为３８７１％。肉与肉制品１８株检出菌中检出产肠毒素１０株，检出率为５５５６％；其中携带ＳＥＡ毒素基因９株（有２株同时携带ＳＥＣ毒素基因），携带ＳＥＢ毒素基因１株。餐饮食品１１株检出菌中检出产肠毒素２株，检出率为１８１８％；其中携带ＳＥＡ毒素基因１株，ＳＥＢ毒素基因１株。地方特色食品（鸭舌）检出菌中未检测到肠毒素。２.３药敏试验结果对３１株金黄色葡萄球菌进行１８种抗菌药物药敏试验，结果显示对氨苄西林耐药率为９０３２％，青霉素为８７１０％，红霉素和头孢西丁均为４８３９％，且对克林霉素、四环素、庆大霉素、苯唑西林、环丙沙星、万古霉素、利福平和复方新诺明等均有不同程度的耐药，见表１。本次检测发现３５４８％（１１／３１）的菌株耐３种及以上抗菌药物，有１株菌株耐受７种不同类别的抗菌药物，另有１株菌株耐受８种不同类别的抗菌药物。
３讨论
金黄色葡萄球菌是食物中毒常见的致病菌之一，食品受其污染的机会很多。本次监测的６类食品５４０份样品中，金黄色葡萄球菌检出率为５７４％，低于龙湾区２００９—２０１０年的８８２％［７］。肉与肉制品检出率为１１２５％，高于马雪莲等［８］报道的温州市区检出率８２０％，餐饮食品检出率为６８８％，地方特色食品（鸭舌）检出率为２５０％。这些检出率高的食品均是不需要二次加热就直接食用的食品，易受污染引起食物中毒，提示生产单位应提高卫生意识，控制食品及原料在加工、储存、运输和销售环节中的温度和时间；要特别注意操作卫生，防止操作过程中的二次污染。金黄色葡萄球菌产肠毒素具有抗酶解、耐热的特性，对胃酸有一定的抵抗力。本文采用ＰＣＲ法检测检出菌的传统肠毒素基因，其携带率为３８７１％，高于邓泽静等［９］研究的２２２２％。本次肠毒素检测提示龙湾区肉与肉制品以及餐饮食品受污染形势较为严峻，有引起食物中毒的潜在危险性。此外，食品加工器具及操作台未及时清洗消毒，贩卖环境为敞开或半敞开式，售卖人员卫生意识薄弱，未按要求储藏食物，市民在购买后未及时食用或冷藏，为该菌的繁殖以及肠毒素的产生提供了有利的条件。生产单位及市民应尽量在低温和通风良好的条件下贮存食物，且食用前要彻底加热煮熟，防止由肠毒素引起的食物中毒。本研究药敏检测结果表明金黄色葡萄球菌耐药性较强，对氨苄西林、青霉素、红霉素和头孢西丁的耐药率为９０３２％、８７１０％、４８３９％和４８３９％，并表现出多种耐药，青霉素耐药率高于刘玉娥等［１０］研究的２００９年食品中金黄色葡萄球菌青霉素耐药率８５４０％，低于２０１０年及２０１１年的９１３０％及９７００％。食源性金黄色葡萄球菌耐药性通过动物源性的食物链传播并造成污染，主要原因可能是动物养殖过程中长期使用亚治疗量的抗菌药物，诱导动物肠道内正常菌群和寄居的病原菌产生耐药性，导致动物源性食品中病原菌耐药株的产生且迅速蔓延引起环境或食品的污染。为防止耐药性细菌引起的危害，食品生产及其他有关部门应加强养饲料抗菌药物的监管和检测力度，加强对食源性致病菌耐药性的检测，及时掌握病原菌的耐药状况，减低耐药危害的发生，指导临床合理选择有针对性的抗菌药物。
参考文献
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［７］王晓红，朱珠英．食品中食源性病原菌污染现况研究［Ｊ］．浙江预防医学，２０１１，２３（５）：１２－１６．
［８］马雪莲，陈慧燕．食品中金黄色葡萄球菌及肠毒素检测与耐药性分析［Ｊ］．海峡预防医学杂志，２０１１，１７（５）：５６－５７．
［９］邓泽静，李毅，洪程基，等．食品中金黄色葡萄球菌污染现况及其毒素检测［Ｊ］．浙江预防医学，２０１１，２５（２）：９２－９４．
［１０］刘玉娥，刘文羽．４年食品中金黄色葡萄球菌的分离及耐药性研究［Ｊ］．现代预防医学，２０１４，４１（６）：１０９４－１０９６．
作者：张素燕 姜娴 王晓红 周珊慧 单位：温州市龙湾区疾病预防控制中心
