1材料与方法
1.1培养基与试剂
TT肉汤、RV肉汤培养基、XLT4培养基、缓冲蛋白胨水、LB培养基为BD公司生产;API20E为法国生物梅里埃公司生产;沙门菌血清为泰国生产。
1.2样品的采集
每月20只鸡,其中15只鲜鸡胴体,5只冷冻鸡胴体。均采于长春市各超市和农贸市场。于实验当日清晨在实验室周边超市或农贸市场采集冷冻整鸡样品、冰鲜整鸡样品和现宰杀整鸡样品于stomacher3500?匀浆袋中称重,详细记录样品信息后带回实验室进一步分析。
1.3检测方法
1.3.1样品的处理鸡胴体样品无菌称量、放于stomacher3500?匀浆袋中,无菌操作条件下加入灭菌缓冲蛋白胨水后(加入量为500mL/kg),反复揉搓样品2~3min(注意各个部位均要揉到);均质。1.3.2前增菌鸡胴体样品充分混匀淋洗液后,取10mL置于15mL无菌空试管中;另取1mL和0.1mL淋洗液,分别置于盛有9mL和9.9mL无菌缓冲蛋白胨水的试管中并充分混匀,每个浓度做3个平行,于(37±1)℃震荡(100r/min)增菌20~24h。1.3.3选择性增菌取出前增菌管并充分混匀后,分别从各浓度的每个试管中取(0.5±0.05)mL菌液至10mLTT肉汤中;另取(0.1±0.02)mL菌液至10mLRV肉汤中,(42±0.5)震荡(100r/min)培养20~24h。1.3.4接种平板取出选择性增菌管并充分混匀后,取各浓度的增菌液1环(直径3mm),分别接种于XLT4培养基,(37±1)℃培养20~24h。1.3.5XLT4平板纯化从XLT4平板上挑取菌落中心为黑色、周边为无色透明环的典型菌落,接种于XLT4平板纯化,(37±1)℃培养20~24h后,挑取单个菌落划线接种于LB培养基,(37±1)℃培养20~24h后进行生化确认。1.3.6血清学试验用沙门菌多价血清及各因子血清做玻片凝集试验。1.3.7生化确认用API20E或自动化鉴定仪对LB平板上生长的菌落进行生化确认并记录结果。1.3.8结果报告根据证实为沙门菌阳性的试管管数,查MPN检索表,报告每克(mL)沙门菌MPN值。
2结果
全年共检测市售鸡胴体240只,共检出沙门菌阳性样品155份,阳性率为64.6%(155/240)。全年每月均有检出,阳性率达15%~100%,7月份阳性率最高,达到100%,其次8月份为90%,6月份为80%(见图1)。冷藏储存条件下鸡胴体的沙门菌感染率(72.7%)远高于冷冻条件鸡胴体(38.6%)。沙门菌的感染水平冷藏储存条件下≥1100(MPN/100g),远高于冷冻条件下鸡胴体9.2(MPN/100g)。在农贸市场采集鸡胴体中沙门菌感染率(71.1%)远高于在大型超市采集鸡胴体(36.9%)。在农贸市场采集鸡胴体沙门菌的感染水平≥1100(MPN/100g),远高于在大型超市采集鸡胴体460(MPN/100g)。
3讨论
每个月都有沙门菌检出,并且全年样品总检出率为64.6%,说明长春市市售鸡胴体感染沙门菌较严重;6、7、8月份阳性率高与当时天气温度高,有利于沙门菌不断繁殖有关。冷藏储存条件下鸡胴体样品中沙门菌的检出率及其含菌量均高于冷冻条件下,经统计学分析两种储存条件下鸡胴体样品中沙门菌检出率差异有统计学意义(P<0.01),这说明冷藏储存比冷冻条件下储存的温度高,更适合于沙门菌的存活和繁殖。农贸市场鸡胴体样品中沙门菌的检出率及其含菌量均高于大型超市,经统计学分析两种采样点鸡胴体样品中沙门菌检出率差异有统计学意义(P<0.01),说明大型超市的卫生状况要好于农贸市场,但4月份阳性率低也是因为该月份在大型超市采集的样品的比例比其他月份大。所以为了控制鸡胴体感染沙门菌,我们提出以下风险管理措施:(1)运输、零售环节要有良好的存放条件、防止交叉污染。(2)家庭自己制作时要充分加热烹调,充分杀灭鸡胴体产品中的沙门菌。菜板要生熟分开,防止交叉污染。(3)政府及相关部门应加强零售鸡胴体产品的监管力度,完善相关食源性疾病监测体系。(4)把沙门菌风险评估工作作为工作重点,以尽可能减少其造成的健康危害。
作者:张玲 刘桂华 单位:吉林市疾病预防控制中心 吉林省疾病预防控制中心
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