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猪动脉粥样硬化模型研究进展

1高脂饲料加球囊拉伤术

高脂饲料喂养加球囊拉伤术是制备动脉粥样硬化模型的方法,可以在一定程度上缩短造模的时间,增强造模的效果。在国内外球囊拉伤术已被广泛应用于AS模型的建立。其拉伤的部位也有冠状动脉拉伤、颈动脉拉伤、髂动脉、胸主动脉拉伤等多处。1994年MarkJ.Post等[9]应用兔子与尤卡坦小型猪进行髂动脉球囊拉伤的血管再狭窄并结合了高脂高胆固醇饮食诱导,在实验的最后观察到正常饮食组在行球囊拉伤后髂动脉内膜增厚(11±11)%,高脂高胆固醇饮食组在结合球囊拉伤后髂动脉内膜增厚(49±23)%,并总结出血管重塑的更大的原因是血管管腔狭窄后血流减低造成的,同时反映出了高脂高胆固醇饮食对AS造模的重要性。2005年毕建忠等[10]通过高脂饲料喂养加过大球囊扩张制备颈动脉粥样硬化性狭窄模型,12周后损伤侧颈动脉均出现动脉粥样硬化改变,最高可高达Ⅵ级。在同一年,冯大明等[11]通过高脂饲料喂养1个月后行右颈总动脉内膜损伤术,得到颈动脉粥样硬化的模型,其中1例在粥样斑块的基础上形成血栓并完全堵塞血管腔。2006年管耘园等[12]通过高脂饲料喂养加过大球囊扩张建立小型猪冠状动脉粥样硬化模型,造模成功率达94.7%。球囊拉伤已广泛应用于AS模型的建立,且其技术已比较成熟,能缩短AS造模时间,但球囊拉伤造模成功需建立在高脂高胆固醇饮食的基础上,单纯靠球囊拉伤无法得到理想的AS模型,且手术麻醉、球囊拉伤过程均存在一定风险。

2病症结合模型

2.1气虚血瘀

2011年王勇等[13]通过采用冠状动脉前降支放置Ameroid缩窄环的方法制备慢性心肌缺血模型,并在术后8~12周观察小型猪是否存在气虚血瘀证,通过四诊的收集、血液流变学变化、超声评价及冠脉造影等方法总结出实验模型从4~8周的“血瘀证”向8~12周的“气虚血瘀证”转变,并最终形成气虚血瘀证。

2.2痰浊血瘀证

2009年刘建勋等[14]通过高脂饲料喂养模拟饮食不节,过食肥甘厚味,致实验动物脾失健运,聚湿成痰。并在此基础上,行冠脉拉伤,最终导致痰浊夹瘀,得到表现为痰瘀互结的中医病症模型。

2.3动脉结扎

动脉结扎较球囊拉伤而言并不普遍,但动脉结扎可以在短时间内形成较球囊拉伤而言更严重的AS病变模型。A.Ishii等[15]应用尤卡坦小型猪进行颈动脉结扎术配合高脂高胆固醇饮食进行颈动脉的AS造模,且同时与球囊拉伤配合高脂高胆固醇饮食造模进行相对的比较。两种实验方法均得到了颈动脉的AS改变,相比两种方法,经动脉结扎组观察到了斑块内出血以及钙化,而颈动脉球囊拉伤组的特征性改变是血管内膜增厚。

3评价指标

实验动物动脉粥样硬化的评价通常有血脂指标、影像学指标、病理等几方面。

3.1血脂指标

由于猪对胆固醇的反应与人相似,所以实验动物的血脂水平的测定是简单易行而又必不可少的监测指标。报道的需要监测的指标一般包括甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白固醇(LDL-C)等。在实验过程中,一般TG的变化水平不大,而TC、LDL-C、HDL-C则会在高脂高胆固醇饮食开始后升高,一般在3~4个月大幅升高,且达到峰值,在6个月左右会有所回落。

3.2影像学

影像学检查包括X线、CT、超声检查、MRI、造影检查等。[16]X线往往只有在心脏发生严重病变而导致心脏大小的改变时可以发现其异常。普通CT与X线也只有在心脏发生严重病变时可以发现异常,但增强CT(CTA)可以重建血管的三维成像,可用于观察冠状动脉主要分支有无狭窄、狭窄部位、范围等等。MRI成像技术目前适用于心肌梗死和室壁瘤患者,近年来已能用MRI技术获得冠状动脉图像。血管内超声能够准确的掌握血管壁的形态、狭窄程度以及斑块的厚度和大致结构,但是在近10年来,血管内超声技术并未在我国广泛应用。动脉造影是目前主要应用的用于检查血管走形、血管狭窄及其部位范围的主要手段,但动脉造影需要在猪全麻下进行,所以存在一定的风险。

3.3病理组织学

病理组织学是检验动脉粥样硬化模型建立是否成功的最直接标准。小型猪的AS病变主要发生在大动脉及中动脉,可以观察到不同程度的AS病理改变,其中以腹主动脉、髂动脉、冠状动脉等较为明显。在高脂高胆固醇饮食诱导下(4~12个月)可观察到的最严重病变可达到V级。大动脉及分叉处在4个月开始观察到血管内膜隆起,并随着时间推移,会计类期刊病变范围、隆起高度不断增加;8个月可观察到脂质核形成,很厚的纤维帽,胆固醇结晶及钙化;12个月可观察到中膜平滑肌的变性、坏死和增生[17]。

作者:王超凡


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