１病理检查
给药期结束２４ｈ后，每组半数动物麻醉后，颈总动脉放血致死后取出阴道外周皮肤、子宫、卵巢和完整的阴道，并将阴道纵向切开，肉眼观察内壁是否有充血、红肿等症状，以１０％福尔马林固定后将阴道分上（靠近阴道穹窿处）、中（阴道壁的尿道开口处）、下（靠近阴门裂处）三段取材，制备石蜡切片进行组织病理学检查；各组剩余动物继续观察至１４ｄ再解剖进行病理组织学检查。
２结果
２．１破损阴道外周皮肤刺激性试验
每次去除药物后１ｈ、再次贴敷前以及末次贴敷去除药物后１和２４ｈ分别肉眼观察阴道外周皮肤，均未见明显红斑及水肿，未发现色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄等症状。每一观察时间点各组积分均值以及观察期限内每天每只动物积分均值均为０。组织病理学检查结果显示，赋形剂组０３８＃皮肤黏膜轻度水肿，血管轻微充血；阳性对照组０４２＃皮肤黏膜可见少量炎细胞，血管轻微充血；低剂量组０３２＃组织内可见一处小炎性细胞灶；余赋形剂组、阳性对照组、高、中、低剂量组及其恢复期未见明显异常。上述由于赋形剂组、阳性对照组和低剂量组虽各出现１只轻微病理异常的动物，但妇炎消泡腾片中剂量和高剂量组均未见上述明显的病理诊断异常。因此，上述异常考虑为给药过程中人为机械刺激所导致，与药物无关。
２．２破损阴道黏膜刺激性试验
给药前各剂量组动物均存在由于阴道破损而造成的不同程度的阴道口充血、水肿和血色分泌物，首次给药后第二天发现各剂量组动物均出现阴道口充血、水肿和（或）分泌物，并一直持续至给药期结束。恢复期初期仍可见上述异常，至恢复期第十三天上述异常基本消失。组织病理检查结果显示，正常动物阴道组织各层结构清晰，黏膜层细胞排列规整，前庭部为鳞状上皮细胞，阴道黏膜部为柱状上皮，未见坏死脱落，可见散在淋巴细胞及少量中性粒细胞分布其间，固有层血管分布丰富，未见水肿渗出，肌层细胞排列规整，无炎性细胞浸润。异常动物阴道组织黏膜及黏膜下层可见少量或中量炎细胞，少量红细胞，局部黏膜层部分程度坏死脱落（图１）。按Ｅｃｋｅｓｔｅｉｎ刺激性评价标准，给药期阳性对照组阴道黏膜刺激性平均积分为６．２５，与文献报道结果一致［８－９］，说明本试验系统是可靠的。赋形剂组、高、中、低剂量组阴道黏膜刺激性平均积分分别为１．００、１．２５、１．５８和１．００，对应的各组阴道黏膜刺激指数分别为０、５．２５、０．２５、０．５８和０，刺激性强度分别为无刺激性、轻度刺激性、无刺激性、无刺激性和无刺激性（结果见表１）。恢复期赋形剂组和低剂量组阴道黏膜刺激性平均积分均为０，阳性对照组、高和中剂量组阴道黏膜刺激性平均积分分别为０．８３、０．０８和０．２５，对应的各组阴道黏膜刺激指数分别为０．８３、０．０８和０．２５，刺激性强度均为无刺激性（结果见表２）。２．３对子宫和卵巢的影响组织病理学检查结果显示赋形剂组、阳性对照组、低、中、高剂量组及其恢复期，各组新西兰兔子宫组织结构清晰，未见明显异常；低剂量组和高剂量组各１只动物卵巢皮质处可见两处小钙化灶，常见于自发性病变。其余未见明显异常。结果见图１。
３讨论
近年来在崇尚自然、回归自然的潮流下，中草药消毒剂在外科和妇产科具有广泛的应用前景。由于中草药消毒剂多为复方制剂，其处方成分复杂，发挥作用的有效成分及产生毒性的物质不甚明确，故需加强质量控制并建立相关的含量限度检查和安全性试验，尤其是含有有效成分和有毒成分尚不明确的中药复方制剂，同时根据中药现代化和中药再评价的要求，进行科学严谨的临床前安全性评价有重要意义。妇炎消泡腾片是由苦参、黄柏、蛇床子、金银花、野菊花、地肤子、白芷、石菖蒲、冰片、猪胆膏等研发而成的泡腾片，与栓剂相比，其优点是在病灶部位分布均匀、迅速，且在体内泡腾后药液不外流污染衣物，患者无不适感，适从性好［１０］。临床上用于治疗阴道炎等湿热下注所致的带下、阴痒病。由于阴道内致病性病原微生物的繁殖，代谢可引起阴道内正常ｐＨ值（４．０～４．５）向碱性改变，同时又促进致病菌的生长繁殖，加重感染。通过用药，适宜的酸碱度可改变阴道内的ｐＨ值，改善局部微环境，恢复阴道自净作用，从而有效控制感染。但是经常对阴道进行较高浓度的给药，也可造成不同程度的阴道和宫颈上皮的损伤，反而破坏了阴道所固有的自洁系统，使局部抵抗力下降，为寄生于阴道内有害菌的生长繁殖或为外在病原菌的入侵提供可乘之机，成为引起感染的重要因素［１１］。妇炎消泡腾片，临床为阴道用药，为了充分了解药物的刺激性，本实验不仅考察供试品对阴道黏膜的刺激作用，还考虑到供试品使用中可能接触阴道黏膜周围的皮肤，故同时进行阴道内外给药并增加破损皮肤用药。由于未见有关阴道内外破损皮肤黏膜给药的刺激性试验研究文献以及相应的评价标准，故本试验增加阳性对照药壬苯醇醚栓（ＮＰ－９）验证试验系统的可靠性，一方面参照《中药、天然药物刺激性和溶血性研究的技术指导原则》的皮肤刺激反应评分标准，一方面按Ｅｃｋｅｓｔｅｉｎ报道的黏膜刺激性评价标准。结果表明，通过本实验，在考察妇炎消泡腾片皮肤黏膜刺激性的同时，也进一步探索了该类药物阴道内外破损皮肤黏膜给药的评价标准。本实验综合肉眼观察结果，同时结合病理组织学检查结果，妇炎消泡腾片低（０．１ｇ／只）、中（０．１５ｇ／只）和高剂量组（０．２ｇ／只）对新西兰兔破损阴道外周皮肤均无刺激性；妇炎消泡腾片低（０．６ｇ／只）、中（１．２ｇ／只）和高剂量组（１．８ｇ／只），分别为临床使用剂量的２４、４８和７２倍，对新西兰兔破损阴道黏膜均无刺激性。妇炎消泡腾片低、中和高剂量组对新西兰兔破损阴道外周皮肤和阴道黏膜均无刺激性，说明该药对机体寝室管理论文局部皮肤和黏膜使用是安全的。
作者：黄秋凌 骆永伟 姜娟 崇立明 李雷 周杰 周莉 孙祖越
