1仪器与材料
Bruker-APX-40型核磁共振光谱仪(TMS为内标,瑞士Bruker公司);INOVA-400型核磁共振光谱仪(TMS为内标,美国Varian公司);电热恒温水浴锅(北京市永光明医疗仪器厂);EYBLA旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司);SHZ-D9(Ⅲ)循环水式真空泵(巩义市予华有限责任公司);SK5200HP超声波清洗器(上海科导仪器有限公司);Adeven-turerTMAR1140万分之一电子分析天平(美国Ohaus公司);柱色谱反相ODS(日本YMC);Seph-adexLH-20(GEHealthcare);柱色谱用硅胶(200~300目)、薄层硅胶板(青岛海洋化工厂);所用试剂均为分析纯。实验用洋金花种子于2012年9月至10月采自新疆石河子市南山,经笔者谭勇教授鉴定为茄科植物白花曼陀罗DaturametelL.的干燥种子。
2提取与分离
干燥洋金花种子20kg,10倍量75%乙醇回流提取3次,每次3h,减压浓缩得浸膏844.5g,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,萃取液浓缩后得石油醚部位浸膏67.24g、乙酸乙酯部位浸膏285g、正丁醇部位浸膏96.21g。取乙酸乙酯部位浸膏经硅胶柱层析分离,以石油醚-乙酸乙酯溶剂系统梯度洗脱,得到28个流分Fr.1~28,其中,Fr.6~26经反复硅胶、ODS、SephadexLH-20柱色谱分离纯化,多次使用制备薄层板制备后纯化得到化合物1(45.3mg)、2(13.7mg)、3(17.6mg)、4(8.9mg)、5(8.2mg)、6(57.2mg)、7(36.9mg)、9(125mg)、10(8.5mg)。取正丁醇部位浸膏经硅胶柱色谱分离,以氯仿-甲醇溶剂系统梯度洗脱,得到21个流分Fr.1~21,Fr.3经反复的硅胶柱层析分离得到化合物8(21mg)。
3结构鉴定
化合物1:白色针晶,易溶于氯仿、甲醇,分子式为C11H10O5。1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:7.84(1H,d,J=9.4Hz,H-4),7.08(1H,s,H-5),6.18(1H,d,J=9.4Hz,H-3),3.91(6H,d,J=19.8Hz,2×OCH3);13C-NMR(101MHz,CD3OD)δ:163.7(C-2),112.1(C-3),146.7(C-4),107.6(C-4a),104.9(C-5),145.4(C-6),143.7(C-7),133.5(C-8),142.9(C-8a),56.9(-OCH3),61.6(-OCH3)。以上数据与文献〔4〕报道对照基本一致,故鉴定化合物1为异嗪皮啶。
化合物2:无色针晶,易溶于甲醇,分子式为C11H10O4。1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:7.63(1H,d,J=9.4Hz,H-4),7.17(1H,s,H-5),6.99(1H,s,H-8),6.28(1H,d,J=9.4Hz,H-3),3.93(3H,s,6-OCH3),3.91(3H,s,7-OCH3)。以上数据与文献〔5,6〕报道对照基本一致,故鉴定化合物2为滨蒿内酯。
化合物3:白色粉末,易溶于氯仿,分子式C30H50O2。1H-NMR(600MHz,CDCl3)δ:5.24(1H,t,J=3.6Hz,H-12),4.58(1H,brs,H-6),3.16(1H,dd,J=10.6,5.1Hz,H-3),1.33(3H,s,H-25),1.27(3H,s,H-26),1.18(3H,s,H-24),1.11(3H,s,H-27),1.08(3H,s,H-23),0.88(6H,s,H-29,30),0.84(3H,s,H-28);13C-NMR(600MHz,CDCl3)δ:40.7(C-1),27.4(C-2),79.1(C-3),39.6(C-4),55.6(C-5),68.7(C-6),40.8(C-7),38.9(C-8),47.9(C-9),36.4(C-10),23.4(C-11),122.1(C-12),144.3(C-13),42.3(C-14),26.1(C-15),27.0(C-16),32.5(C-17),47.3(C-18),46.8(C-19),31.1(C-20),34.7(C-21),37.1(C-22),27.9(C-23),17.0(C-24),17.1(C-25),18.4(C-26),26.0(C-27),28.4(C-28),33.3(C-29),23.7(C-30)。以上数据与文献〔7-10〕报道对照基本一致,故鉴定化合物3为曼陀罗萜二醇。
化合物4:白色针晶,易溶解于甲醇,分子式为C6H4(OH)2。1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:8.55(2H,s,1,4-OH),6.61(4H,s,H-2,3,5,6);13C-NMR(400MHz,CD3COCD3)δ:151.1(C-1,4),116.4(C-2,3,5,6)。以上数据与文献〔11〕报道对照基本一致,故鉴定。化合物4为对苯二酚。
化合物5:黄色针晶,易溶于氯仿、甲醇,分子式为C13H10N2O2。1H-NMR(600MHz,CD3OD)δ:8.43(1H,d,J=4.9Hz,H-3),8.18(1H,d,J=4.9Hz,H-4),8.08(1H,d,J=8.5Hz,H-5),7.27(1H,d,J=2.0Hz,H-7),6.88(1H,dd,J=8.5,2.1Hz,H-6),2.76(3H,s,-COCH3)。以上数据与文献〔12〕报道对照基本一致,故鉴定化合物5为ArenarineD。
化合物6:无色针晶,易溶于氯仿,分子式为C8H8O3。1H-NMR(600MHz,CDCl3)δ:9.83(1H,s,H-7),7.43(1H,d,J=5.4Hz,H-6),7.42(1H,d,J=1.8Hz,H-2),7.04(1H,d,J=8.5Hz,H-5),5.98(1H,s,4-OH),3.97(3H,s,3-OCH3)。以上数据与文献〔13〕报道对照基本一致,故鉴定化合物6为香草醛。
化合物7:白色粉末,易溶于甲醇,分子式为C18H19NO4。1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:7.45(1H,d,J=15.5Hz,H-8'),7.11(1H,d,J=2.0Hz,H-2'),7.06(2H,dd,J=8.5,2.0Hz,H-2,6),7.03(1H,dd,J=8.1,2.0Hz,H-6'),6.80(1H,d,J=8.2Hz,H-5'),6.72(2H,dd,J=8.5,2.0Hz,H-3,5),6.41(1H,d,J=15.6Hz,H-7'),3.87(3H,s,3-OMe),3.46(2H,t,J=7.3Hz,H-8),2.75(2H,t,J=7.3Hz,H-7)。以上数据与文献〔14〕报道对照基本一致,故鉴定化合物7为N-阿魏酰酪胺。
化合物8:黄色结晶,易溶于甲醇,分子式为C10H8O4。1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:7.77(1H,d,J=9.5Hz,H-4),7.00(1H,s,H-5),6.64(1H,s,H-8),6.07(1H,d,J=9.4Hz,H-3),3.81(3H,s,-OCH3)。以上数据与文献〔15,16〕报道对照基本一致,故鉴定化合物8为东莨菪内酯。
化合物9:白色不规则结晶,易溶于丙酮、氯仿,微溶于甲醇,分子式为C29H50O。与β-谷甾醇对照品共薄层,在3种不同展开剂条件下的色谱行为一致。故鉴定化合物9为β-谷甾醇。
化合物10:无色针晶,易溶于氯仿,分子式为C28H40O6。13C-NMR(400MHz,CDCl3)δ:203.2(C-1),129.0(C-2),139.6(C-3),36.8(C-4),73.2(C-5),56.3(C-6),57.3(C-7),35.7(C-8),35.5(C-9),51.0(C-10),21.9(C-11),39.9(C-12),43.4(C-13),23.5(C-15),27.2(C-16),52.4(C-17),12.1(C-18),14.7(C-19),39.1(C-20),12.6(C-21),65.3(C-22),29.3(C-23),63.9(C-24),65.0(C-25),91.7(C-26),16.6(C-27),19.1(C-28)。以上数据与文献〔17〕报道对照基本一致,故鉴定化合物10为Hyoscyamilac-tol。
作者：韩晓琳 单位：石河子大学药学院
