一转基因食品
通过基因工程，将DNA分子在生物体外插入载体分子，实现物质重组，并转化到寄主细胞中，经过表达形成需要的物质，且稳定遗传下去，称为转基因食品。美国于20世纪80年代初期研究转基因食品，是应用技术最多的国家。继美国之后，阿根廷和加拿大大量应用此技术，其中阿根廷约有30%以上大豆播种使用改变基因豆种，加拿大约有50%玉米及大豆播种食用转基因种子。当前，在世界范围内，约有50个国家进行植物田间转基因试验，且涉及植物较多，约4500种。现阶段，油菜、大豆、棉花和玉米借助此技术已经实现了大面积商品化种植，而木瓜、西红柿、西葫芦、马铃薯等实现小面积种植。借助该技术，粮食食品加工特性及食用品质得到改善，发酵食品品质及风味得到明显改善，附加值及营养价值大大提高。
二转基因食品蛋白质检测
1试纸法
将特异性抗体交联到有颜色物质和试纸条上，特异抗原与抗体互相结合后，与有颜色抗体相互反应，形成三明治机构，且带有颜色，将机构于试纸条上固定，若无抗原，则无颜色。试纸法适用于初筛及现场检测，方法简便，无需特殊设备仪器。
2ELISA
ELISA将酶对底物高效催化反应与抗体、抗原特异性反应互相结合，利用酶对底物产生作用，引起显色反应，抗体与抗原互相结合时，利用荧光反应或比色反应对GMF进行鉴定。酶作用显色与样品抗原含量之间有一定关系，呈正比。ELISA不仅能实现样品的定性检测，也能给予定量分析。有学者借助此方法，对传统大豆的加工产品进行检测，测得RoundupReady2%大豆CP4EPSPS蛋白质。ELISA检测灵敏性及选择性较强，商业利用性强，但检测复杂基质时，检测准确度及准确性受到一定干扰，若外源基因表达蛋白质经热处理变性或水平较低，则检测有效性下降。
3蛋白质印迹法
此技术结合了显色酶反应灵敏性、电泳分离能力及抗体特异性，为复杂混合物特异蛋白质最佳检测方法，灵敏度1-5ng，广泛用于特异目的蛋白质分离及检测。该技术能够确定样品中有无超过预期限值或低于限值目的蛋白质，尤其是分析不可溶蛋白质。有学者对RoundupReady大豆CP4合成酶检测时，运用该技术，检测限105-1%，证实此技术可有效检测RoundupReady大豆蛋白质及原材料产品。
三转基因食品核酸检测
1多重PCR
此技术对常规PCR的改进，在同一反应中增加多个或两个目标基因序列，具有适应性强、可靠性强特点，检测成本相对较低。有研究对转基因食品中多个目标基因序列进行同时检验，排除假阴性，利用此技术检测转基因大豆，试验显示，当含量0.15%时，多重PCR鉴定可靠性较强，提示此方法具有高度敏感性。
2定性PCR
PCR将特定DNA片段作为模板，借助寡聚核苷酸引物，底物为4种dNTP（脱氧核苷酸），在耐高温的聚合酶作用下，利用模板变性及退火、引物延伸等循环，扩增模板。一般来说，转基因细胞的转入成分有目的基因、启动子、终止子、报告基因，启动子、终止子为基因表达目之必需。常用转基因植物为NOS、CaMV35S，通过PCR扩增序列，为鉴定食品是否有转基因成分常用方法。
3定量PCR
PCR特异性及敏感性较强，核酸在食品加工时的变性程度低于蛋白质，GMF定量PCR包括定量竞争PCR、半定量PCR、实时荧光定量PCR。定量竞争PCR与半定量PCR检测时，面临定量准确度、假阳性污染两大难题。有学者检测转基因大豆RoundupReady时，运用实时荧光定量PCR，灵敏度<0.01%，能够满足检测需要。
4电化学发光PCR
电化学方法能产生特殊物质，电生物质自身之间或与其他物质进一步反应，形成发光现象。此方法为电化学方法、化学发光方法互相结合形成的技术，首次将双探针杂交、电化学发光、PCR技术结合到一起，对CaMV35S启动子进行检测，判定有无转基因成分。此方法较传统凝胶电泳法优势明显，操作简便，且检测线性度较宽。
四结语
目前，转基因食品趋于市场化发展，必须建立有效、完善的检测方法，加强市场监管。转基因任一环节若出现差错，均可影响食品安全，故职称论文需做好食品检测。笔者借助相关文献及资料，分析试纸法、ELISA、蛋白质印迹法、多重PCR、定性PCR等检测技术，供学者参考。
作者：高永欣 刘敏 王丹 孙茂成 左丽丽 单位：吉林医药学院
