本文作者：康东红；王燕；张洪美；冯潇雨；曹维；王萍；成功正常投稿发表论文到《生物工程学报》2014年02期,引用请注明来源400期刊网！

【摘要】：为了研究人成骨细胞刺激因子(Humanosteoblast-stimulatingfactor,OSF-1)的生物学活性,构建OSF-1高效毕赤酵母表达菌株并表达纯化具有生物活性的OSF-1。首先通过全基因人工合成的方法合成人osf-1基因,并克隆至毕赤酵母分泌表达载体pPIC9K,构建重组表达质粒pPIC9K/osf-1,线性化后电转化酵母宿主菌GS115,构建P.pastorisGS115/pPIC9K/osf-1,经MD、G418-YPD平板和PCR法筛选,获得多拷贝转化子。阳性表达菌株在25℃,经1%的甲醇诱导表达96h,重组蛋白的表达量达到最大。经SDS-PAGE电泳分析所表达的重组蛋白约为18kDa,与人成骨细胞刺激因子相符。表达上清经SP-SephadexC-50离子交换层析进行纯化,得到纯度达98%以上的OSF-1。Westernblotting鉴定该蛋白对人成骨细胞刺激因子抗体具有良好的抗原性。生物活性测定表明提纯的OSF-1能促进鼠成骨细胞MC3T3-E1的增殖和分化。利用重组毕赤酵母高效分泌表达了有生物活性的OSF-1,为进一步开展其抗骨质疏松活性研究及产业化开发奠定了基础。
【论文正文预览】：随着社会人口老龄化,骨质疏松(Osteoporosis,OP)已成为世界范围内危害人类健康的日趋严重的医疗问题和社会问题。目前抗OP的药物分为抑制骨吸收和刺激骨形成两大类,但尚不能完全解决OP骨折这一棘手的问题。骨质量由骨小梁的数量和其最佳立体构象所决定。虽然促进骨形成和抑制
【文章分类号】：R580;Q78
【稿件关键词】：OSF-毕赤酵母蛋白表达纯化生物活性
【参考文献】:

• 吴丹;储炬;王永红;庄英萍;张嗣良;;甲醇浓度对毕赤酵母表达重组人复合α干扰素分离纯化得率的影响[J];生物工程学报;2011年12期
• 孟坤;马晓海;张南;;多功能生长因子PTN与受体相互作用及跨膜信号传导[J];生命科学研究;2007年01期
• 姜愚,文艳君,刘继彦,邹春华,田聆,魏于全;小鼠B细胞趋化因子原核表达与纯化[J];生物医学工程学杂志;2004年02期
• 孙叶芳,赵艳萍,刘晗,李强,史俊南;重组人骨形成蛋-2的纯化和复性[J];牙体牙髓牙周病学杂志;2001年02期
• 王雪,宋长征;蛋白质复性的条件及影响因素[J];国外医学(分子生物学分册);2003年06期
• 杨道理,李保昌;蛋白质纯化的方法选择[J];实用医药杂志;2004年12期
• 王雪,韩金祥,党立;大肠杆菌表达的成骨蛋白-1的复性研究[J];山东科学;2005年02期
• 王雪,宋长征;离子交换色谱法对大肠杆菌表达的人重组骨形态发生蛋白-7的纯化[J];中国生物工程杂志;2004年01期
• 王雪,宋长征;离子交换色谱法对大肠杆菌表达的人重组骨形态发生蛋白-7的纯化[J];生物技术通讯;2004年02期
• 王雪,宋长征;大肠杆菌表达的重组人骨形成蛋白-7的复性[J];生物技术通讯;2004年05期
• 高慎阳;查恩辉;王珅;周铁忠;李慧;;一种“高性价比”切胶纯化原核表达蛋白的方法[J];中国农学通报;2010年22期
• 杜承;恶性疟原虫Pf332抗原的免疫原性分析[D];吉林大学;2010年
• 张润祥;重组牛IFN-λ3的制备及其与IFN-α/IFN-β/IFN-γ抗病毒活性比较研究[D];东北农业大学;2013年
• 张倩;RNAi抑制PTN对人增生性瘢痕成纤维细胞作用的实验研究[D];第二军医大学;2013年
• 王小娜;产细菌素植物乳杆菌的初探及其应用[D];浙江工商大学;2011年
• 孙熙麟;重组灵芝免疫调节蛋白（rLZ-8）标准品制备方法的研究[D];吉林大学;2011年
• 王文莉;PTN、COMT和Syndecan-1在重度子痫前期患者胎盘中表达及意义[D];河北医科大学;2011年
• 李道静;氨甲蝶呤对映体耐药A549细胞株二氢叶酸还原酶的基因与蛋白水平表达分析[D];安徽医科大学;2011年
• 胡占东;人源Fab噬菌体抗体库的构建及抗IL-4抗体的初步筛选[D];天津医科大学;2011年
• 王燕;重组人成骨细胞刺激因子高效毕赤酵母表达系统的构建[D];山东大学;2011年
• 夏红霞;Pleiotrophin在周围神经损伤后运动神经倾向性再生中作用的实验研究[D];华中科技大学;2010年
• 冯纬樱;重组人成纤维细胞生长因子-8a的纯化研究[D];广西师范大学;2007年
• 范鑫;蛋白质识别分析试剂的合成研究及醋炙甘遂化学成分变化研究[D];西北大学;2008年
• 周磊;牛γ-干扰素和人溶菌酶共表达载体的构建和表达产物的纯化[D];扬州大学;2008年
• 崔有宏,陈苏民,刘新平,陈南春,薛永涛;大肠杆菌表达的重组人骨形成蛋白-3C端肽的纯化[J];第四军医大学学报;1997年06期
• 王洪海,高卜渝,陈佩丽,董灵,李育阳;酵母表达基因工程产物不均一性分析及其对策[J];中国科学(B辑 化学 生命科学 地学);1994年12期
• 史琪琪;郝玉有;吴康华;储炬;庄英萍;张嗣良;;诱导相温度对毕赤酵母表达重组人复合α干扰素聚合的影响[J];生物工程学报;2006年02期
• 张盛;郝玉有;储炬;王永红;郭美锦;张嗣良;庄英萍;;pH对毕赤酵母表达重组人复合α干扰素的降解影响[J];生物工程学报;2008年01期
• 张莹,张郁,孙叶方,史俊南;TGF-β对人牙乳头间充质细胞增殖和细胞周期的影响[J];牙体牙髓牙周病学杂志;1999年04期
• 高原,于吉人,郑树森;多向生长因子在胃癌生长转移中的作用[J];中华医学杂志;2001年08期
• 刘继彦,杨莉,刘芬,邓洪新,田聆,侯建梅,姜愚,吴扬,胡兵,魏于全;小鼠血管内皮生长因子受体2胞外片段重组蛋白的制备及其初步应用[J];中国现代医学杂志;2002年24期
• 堵益平;高敏杰;金虎;史仲平;;不同控制模式对毕赤酵母表达IL-2-HSA的比较研究[J];生物学杂志;2008年04期
• 马团;宇丽;李发涛;周羽竝;;采用反向PCR技术优化适合毕赤酵母表达的截短型HPV58型L1基因[J];暨南大学学报(自然科学与医学版);2009年06期
• 高宇;赵红蕾;冯新;刁昱文;刘珊珊;李林溪;顾敬敏;韩文瑜;雷连成;;毕赤酵母工程菌株表达人溶菌酶-鲎素融合蛋白发酵条件的优化[J];动物医学进展;2011年08期
• 平续斌;李志敏;叶勤;黄秀东;曹之舫;;甲醇流加策略对重组毕赤酵母表达人肝再生增强因子的影响[J];中国医药工业杂志;2008年11期
• 年四季;李祥;黄黎;曹新梅;周云刚;袁青;;人TLR1胞外段原核表达载体的构建、蛋白表达及纯化[J];中国免疫学杂志;2010年12期
• 骆诗鸿;;巴斯德毕赤酵母高效表达外源蛋白的策略[J];海峡药学;2007年02期
• 陈霖;李晶;侯建伟;舒震;张伟;张英起;;重组人B7-H1IgV发酵纯化工艺的建立及其抑瘤活性[J];中国生物制品学杂志;2010年06期
• 陈伟民;王飞;;人核迁移蛋白C在毕赤酵母中的融合表达[J];甘肃医药;2010年05期
• 李莹莹;万琳;杨浩;刘珊;蔡华伟;卢晓风;;人可溶性TRAIL基因的克隆及其在毕赤酵母中的重组表达[J];生物医学工程学杂志;2010年06期
• 张亚前;李庆伟;吕莉;刘欣;王继红;;日本七鳃鳗Lj-RGD3缺失突变体Lj-113人工合成序列的基因克隆与蛋白表达[J];吉林医药学院学报;2011年02期
• 苏可;李孔玲;魏蕾;;人VASP蛋白表达载体的构建表达及其蛋白纯化[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年
• 粟宽源;陈文吟;郑业华;余宙耀;;人源抗-HBs抗体在毕赤酵母中的高密度表达[A];中华医学会第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议论文汇编[C];2005年
• 张鹏翼;夏志洁;胡玮;李越中;;双选择抗生素作用下的E.coli DH5α(pRK2013)/HB101接合蛋白表达差异[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
• 吴群;郑芳;姜小丹;冯玮;熊平;刘君炎;龚非力;;人类自然杀伤细胞中syntaxin 4和SNAP-23蛋白表达、定位和相互作用[A];湖北省暨武汉市免疫学会第八届学术会议论文集[C];2003年
• 蒲广西;邓刚;符启骄;周湘龙;符兆理;陈海宁;郝新保;白玉杰;梁国栋;;毕赤酵母发酵生产重组人粒细胞集落刺激因子[A];海南生物技术研究与发展研讨会论文集[C];2006年
• 史宝军;崔细鹏;陈丽芝;吕东海;周镇锋;;毕赤酵母表达的木聚糖酶的分离纯化及其性质研究[A];动物营养与饲料研究——第五届全国饲料营养学术研讨会论文集[C];2006年
• 马玲;邵帅;潘汉世;陈凤莲;黄红梅;吴健敏;;抗CD22人源基因工程多价微型抗体在重组杆状病毒中的表达及纯化[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集[C];2008年
• 王波;苏丽;张玉华;魏广智;王广义;王字玲;;血小板糖蛋白GPIbavWF结合域在酵母中的表达鉴定[A];第三届全国血液免疫学学术大会论文集[C];2003年
• 李志宏;张国成;许东亮;李小青;孙新;丁翠玲;;B19病毒VP1蛋白的表达及单克隆抗体的研究[A];西北五省（区）第六届儿科学术交流大会论文汇编[C];2008年
• 刘一尘;张春杰;程安春;程相朝;李银聚;吴庭才;丁轲;;新城疫病毒HN蛋白表达条件的优化、纯化及其活性鉴定[A];第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集（下册）[C];2010年
• 胡德荣;生物体内痛觉诱发和维持新机制被揭示[N];健康报;2008年
• 杨骏;蝈蝈投河自杀之谜原是体内虫子在作祟[N];新华每日电讯;2005年
• 本报记者 杨纯?　房琳琳;不比设备比科研[N];科技日报;2007年
• 吴志军 胥金章;我国启动重大疾病蛋白质组学研究项目[N];中国高新技术产业导报;2002年
• 本报记者 刘祖华;解码人体基因 提高生命价值[N];中国组织人事报;2011年
• 实习生 龚晓蕾　记者 许琦敏;米饭也能调控你的基因？[N];文汇报;2011年
• 刘朔;纳豆激酶基因密码子优化设计与合成及在毕赤酵母中的高效表达[D];南京农业大学;2007年
• 陈潮文;DC-SIGN蛋白表达及其生物活性分析[D];暨南大学;2008年
• 贾雪梅;艾滋病毒Vpr蛋白抑制KSHV裂解性周期复制：GSK-3β信号通路的作用[D];南京医科大学;2010年
• 李燕;沙眼衣原体Pmp蛋白的表达纯化及其临床检测的研究[D];天津医科大学;2007年
• 王建业;禽腺联病毒YZ-1株的分离、基因组克隆、基因表达及感染性病毒拯救[D];扬州大学;2008年
• 王庆杰;新型毕赤酵母表面展示系统的构建及表达研究[D];山东大学;2008年
• 孔宁;重组人OSM的制备及诱导肝癌细胞分化的实验研究[D];吉林大学;2009年
• 林景卫;真菌免疫调节蛋白（FIP）在毕赤酵母（Pichia pastoris）GS115中的重组表达及其生物学活性的研究[D];东北师范大学;2009年
• 杜昆;沙眼衣原体CT703蛋白在感染细胞中的表达及功能初探[D];中南大学;2011年
• 郑桂玲;鳞翅目昆虫胚胎细胞系的建立和高蛋白表达细胞克隆株的研究[D];山东农业大学;2010年
• 吴迎春;毕赤酵母表达XRN1蛋白及响应面法优化基础盐发酵培养基[D];浙江理工大学;2013年
• 卢希彬;密码子优化的人生长素基因在大肠杆菌及人生长素基因在毕赤酵母中表达的研究[D];华东师范大学;2006年
• 张倩;透明颤菌血红蛋白的表达提高毕赤酵母的菌密度和TNFRⅡ-FC融合蛋白的产量[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年
• 陈炜烨;人IL-1R Ⅰ胞外区毕赤酵母表达载体的构建和表达[D];广州中医药大学;2010年
• 唐浩;毕赤酵母表达基因工程抗体高效发酵及纯化工艺研究[D];第四军医大学;2007年
• 堵益平;毕赤酵母高效表达融合蛋白的环境和控制条件研究[D];江南大学;2008年
• 罗竞红;重组甲状旁腺激素在毕赤酵母中的分泌表达及条件优化[D];电子科技大学;2007年
• 张峥;大肠杆菌体内自抑制回路的调控蛋白表达分布[D];吉林大学;2013年
• 王鹏;重组毕赤酵母生产人生长激素的发酵条件研究[D];西北大学;2008年
• 王文凯;由IOEP法和pAOX-HT载体介导的高效毕赤酵母表达流程的建立[D];华南理工大学;2011年

【稿件标题】：OSF1在毕赤酵母菌中的分泌表达及其生物活性
【作者单位】：山东大学附属千佛山医院;
【发表期刊期数】：《生物工程学报》2014年02期
【期刊简介】：《生物工程学报》杂志是由中华人民共和国新闻出版总署、正式批准公开发行的优秀期刊，生物工程学报杂志具有正规的双刊号，其中国内统一刊号：CN11-1998/Q，国际刊号：ISSN1000-3061。生物工程学报杂志社由中国科学院主管、主办，本刊为月刊。自创刊以来，被公......更多生物工程学报杂志社(http://www.400qikan.com/qk/5081/)投稿信息
【版权所有人】：康东红；王燕；张洪美；冯潇雨；曹维；王萍；

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