本文作者：刘颖娟；夏维；刘松梅；沈璠；周新；张红；成功正常投稿发表论文到《中国实验诊断学》2014年11期,引用请注明来源400期刊网！

【摘要】：目的建立新型的均相检测技术AlphaLISA(AmplifedLuminescentProximityHomogeneousAssay)法,检测原发性肝细胞癌(Hepatocelluarcarcinoma,HCC)病人石蜡包埋切片组织(Formalin-fixedandparaffin-embeddedtissue,FFPE)中乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)。方法采用针对HBx蛋白不同表位的两种单克隆抗体X36C和3F6-G10,将其中一种抗体X36C与受体微珠(AcceptorBeads)连接,另一种抗体3F6-G10生物素化,再将HCC病人FFPE总蛋白提取液、供体微珠(DonorBeads)及上述两种处理后的抗体在23℃共同孵育90min后,用EnSpire2300多功能酶标仪检测信号值。结果FFPE蛋白提取液检测信号值为4667,HBx蛋白标准品检测信号值为3606;FFPE蛋白提取液样本对照、试剂对照1(Bio-3F6-G10+Acceptor-X36C+DonorBeads)、试剂对照2(buffer)的信号值分别为5、823、79;当生物素化抗体浓度为0.1625nM时,HBX检测信号达到最大峰值,即AlphaLISA出现HookingEffect;AlphaLISA法检测HBX阈值下限为5pg。结论本实验成功建立了AlphaLISA法,用于检测HCC病人FFPE中的HBX。实验操作过程简单快捷,敏感性高于传统的ELISA技术。
【论文正文预览】：HBx蛋白是由HBV基因组编码的调控蛋白,与乙型肝炎引起的HCC密切相关[1,2]。目前,HBX的检测主要依靠传统的ELISA技术和WesternBlot法。但这两种方法都存在检测所需时间长、检测过程复杂、检测所需样本量大、敏感度低而背景值高等缺陷。尤其是检测成分复杂样本如血清或组织标本
【文章分类号】：R446.6
【稿件关键词】：AlphaLISA乙型肝炎病毒X蛋白原发性肝细胞癌
【参考文献】:

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• 赵芳;岳振峰;吕敬章;洪丹漩;张恒;刘慧玲;黄欣迪;洪小柳;;盐酸克伦特罗的AlphaLISA检测方法的建立[J];食品安全质量检测学报;2014年02期
• 李玉芹;牛文彦;朱黎娜;周宇捷;相平;侯丽英;贾克刚;李会强;;血清肌钙蛋白-I均相化学发光免疫检测方法的建立[J];实用医学杂志;2014年10期
• 陈凯;吴丹;聂庆东;李会强;;促红细胞生成素光激化学发光定量检测方法的建立及评价[J];现代免疫学;2014年02期
• 张存亮;聂福平;王昱;杨俊;李应国;蔡家利;;均相光激化学发光免疫分析技术的研究进展[J];中国动物检疫;2014年03期
• 张艺;黄飚;钮伟民;赵灿培;金坚;;微囊藻毒素-LR超灵敏均相免疫分析方法的建立与优化[J];中国药理学与毒理学杂志;2014年03期
• 杨刚龙;肝细胞癌患者血清糖蛋白质组及其糖链结构研究[D];西北大学;2013年
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• 代洪波;猪亲环素A的原核表达及其对猪传染性胃肠炎病毒体外复制的影响[D];四川农业大学;2013年

【稿件标题】：【慢性乙型病毒性肝炎】AlphaLISA法检测乙型肝炎病毒X蛋白方法学的建立
【作者单位】：武汉大学中南医院医学科学研究中心;武汉市妇女儿童医疗保健中心检验部;武汉大学中南医院基因诊断中心;湖北省黄石普仁医院内科;
【发表期刊期数】：《中国实验诊断学》2014年11期
【期刊简介】：《中国实验诊断学》杂志是由中华人民共和国新闻出版总署、正式批准公开发行的优秀期刊，中国实验诊断学杂志具有正规的双刊号，其中国内统一刊号：CN22-1257/R，国际刊号：ISSN1007-4287。中国实验诊断学杂志社由中华人民共和国教育部主管、主办，本刊为月刊。......更多中国实验诊断学杂志社(http://www.400qikan.com/qk/6974/)投稿信息
【版权所有人】：刘颖娟；夏维；刘松梅；沈璠；周新；张红；

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