本文作者：漆正宇；龚英浩；成功正常投稿发表论文到《中国实验诊断学》2014年08期,引用请注明来源400期刊网！

【摘要】：目的人博卡病毒(HBoV)是近几年发现的一种导致人支气管炎的病原体,本研究旨在表达纯化其VP1衣壳蛋白独有区(VP1-U)抗原,为免疫学诊断治疗奠定基础。方法优化HBoVVP1-UDNA密码子,以适应大肠杆菌原核表达密码子亲嗜性。将密码子优化改造的DNA序列克隆到pET30a(+)原核表达载体,C末端融合表达组氨酸亲和纯化标签。LB培养基增菌,IPTG诱导表达。采用自行设计的纯化缓冲液体系,镍株亲和纯化,超滤浓缩。结果VP1-U蛋白表达效率约为50%,纯化活性蛋白浓度为3.3mg/ml。结论经过密码子优化,合理设计工艺流程,原核表达系统可以高效表达纯化VP1-U活性蛋白抗原。
【论文正文预览】：人博卡病毒(HumanBocavirus,HBoV)为2005年首次报道的一种感染人呼吸道的细小病毒[1],是人支气管炎的一种病原体[2,3]。细小病毒外观呈球形无包膜的正20面体,直径大约20-25nm[4]。HBoV基因组为单链DNA,全长大约5.6kb,主要编码的蛋白有NS1、NP-1、VP1、VP2等[1]。其衣壳蛋白包
【文章分类号】：R392.1
【稿件关键词】：HBoVVP-U抗原纯化
【参考文献】:

• 李孜,余新炳,吴忠道,徐劲,胡旭初;日本血吸虫p50亲免素基因克隆、表达及纯化[J];中国公共卫生;2005年11期
• 王黎芳;周毓玲;顾洁;韩忠朝;;重组凝血酶敏感蛋白-1N端片段对CD36表达阴性的ECV304细胞增殖的抑制[J];中国生物工程杂志;2006年04期
• 张连英;何汉江;尹卫国;汪文玉;占利生;谭立志;;问号状钩端螺旋体外膜蛋白Loa22的克隆、表达及对豚鼠的免疫保护作用研究[J];实用预防医学;2007年06期
• 龚艺;崔亚利;牛司强;张雪梅;胥文春;何於娟;王虹;;肺炎链球菌假想蛋白SPD0414的表达纯化及保守性分析[J];中国免疫学杂志;2010年09期
• 马祖兴;高宁;绳纪坡;于芳;林宇翔;罗维;柯波;胡宝成;;人细胞外基质磷酸糖蛋白MEPE的表达纯化及抗体制备[J];军事医学;2011年01期
• 刘广洋;姚伟;任亚萍;李玉;张英;任魁;张岩锐;沈心亮;;乙型肝炎病毒核心抗原蛋白表达纯化及免疫学分析[J];药物生物技术;2006年03期
• 刘志刚;何毅华;高波;;德国小蠊变应原Bla g2的克隆、表达及其免疫学特性鉴定[J];中国人兽共患病学报;2007年03期
• 柴明青,张东华,陆志檬,谢幼华,沈忠明;SARS-CoVS基因表达及纯化[J];上海师范大学学报(自然科学版);2004年03期
• 许淑芬;刘磊;孙牧男;赵帅;方艳秋;谭岩;;人B型钠尿肽原核表达载体的构建、表达及蛋白纯化[J];中国实验诊断学;2010年02期
• 项军强;蒋红亮;张虹;丁明;赵辅昆;;醛糖还原酶cDNA的克隆和表达[J];浙江理工大学学报;2011年02期
• 包洪;刘爱忠;尹文东;李艳蕾;于庭;;呼吸道合胞病毒F蛋白基因片段真核表达纯化及ELISA方法建立的研究[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
• 王淳;陈誉华;;大肠杆菌脑微血管内皮细胞侵袭蛋白yijP的表达纯化和功能分析[A];中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会论文摘要集[C];2003年
• 侯登勇;张英起;颜真;;人TRAIL基因的克隆表达纯化和活性测定[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
• 冯怡;崔立斌;刘传喧;马清钧;;Endostatin在毕赤酵母中的表达纯化及其生物功能研究[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
• 张鹰;文玲英;孙力;储冰峰;;变形链球菌IuxS与pfs基因的分子克隆,表达纯化与定量[A];全国第八次牙体牙髓病学学术会议论文汇编[C];2011年
• 秦莉;吴少庭;王西明;袁仕善;黄达娜;雷民军;潘晖榕;高世同;张仁利;屈伸;;SARS冠状病毒S蛋白片段2的表达纯化与多克隆抗体的制备[A];全国新出现传染病学术研讨会资料汇编[C];2004年
• 秦莉;吴少庭;王西明;袁仕善;黄达娜;雷民军;潘晖榕;高世同;张仁利;屈伸;;SARS冠状病毒S蛋白片段2的表达纯化与多克隆抗体的制备[A];中华医学会热带病与寄生虫学分会机会性感染学术研讨会论文汇编[C];2007年
• 石君帆;宋广忠;泮结超;漏磊君;John T.Belisle;;结核杆菌H37Rv株重组PstS1蛋白的表达纯化研究[A];2011新型疫苗与抗体创制关键技术及质量控制研讨会论文集[C];2011年
• 杨斌;郝飞;杨希山;杨卫兵;钟白玉;;人HSPC011蛋白表达纯化和单克隆抗体制备[A];中华医学会第十二次全国皮肤性病学术会议论文集[C];2006年
• 魏化伟;冯健男;黎燕;;C5a分子重要功能表位的确定[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
• 苏海川;肿瘤坏死因子凋亡相关配体基因的克隆、表达纯化以及生物活性的初步研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
• 刘东;乙型肝炎病毒HBx蛋白的表达纯化及全基因组蛋白与宿主蛋白之间相互作用组模型的建立[D];第三军医大学;2008年
• 黄耀江;IL-6相关新基因的克隆鉴定、表达纯化及结构功能预测[D];大连理工大学;2001年
• 唐蓓;人TRAIL分子胞外区的克隆、表达纯化及生物学活性鉴定[D];重庆大学;2003年
• 刘海伟;CREG表达调控人血管平滑肌细胞HITASY表型转换机制研究[D];第四军医大学;2004年
• 杨秀清;抗B型肉毒毒素鼠源中和抗体快速制备及其免疫学活性的初步研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
• 王黎芳;重组细胞生长因子结构与功能关系的研究[D];中国协和医科大学;2006年
• 喻刚;重组四价A群链球菌疫苗的基因克隆、表达纯化和免疫原性的初步研究[D];武汉生物制品研究所;2009年
• 朱小飞;病原体Clostridum difficile的乙酰辅酶A合成通路中某些关键金属蛋白的基因克隆、重组表达与纯化及其结构与功能研究[D];复旦大学;2011年
• 谌资;H5N1血凝素蛋白的重组牛痘病毒表达纯化以及耐奥司他韦神经氨酸酶动力学研究[D];中南大学;2009年
• 黄宗炎;梅毒螺旋体抗原在毕赤酵母中的表达纯化和单克隆抗体的制备[D];西北大学;2006年
• 王殿丽;JC病毒VP2蛋白的抗原抗体制备及核定位信号与入核转运受体的鉴定[D];大连医科大学;2008年
• 夏芸;红系转录因子FKLF的表达纯化及初步研究[D];华东师范大学;2004年
• 林孝发;结核亚单位疫苗EAMMB的构建及表达纯化[D];兰州大学;2013年
• 张明;CUEDC2的表达纯化与溶液结构初步探索[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年
• 邱壮伟;靶向HER2的人β防御素2的表达纯化及体外活性研究[D];暨南大学;2012年
• 张馨月;新型双功能糖苷酶的表达纯化及功能研究[D];苏州大学;2013年
• 王跃;结核分枝杆菌HtpG蛋白的表达纯化、结晶及其与CrRNA的相互作用[D];福建农林大学;2013年
• 朱庆华;人类嗜T淋巴细胞病毒Ⅰ型重组env抗原的表达[D];郑州大学;2009年
• 郝兰;人PTH的表达纯化及其免疫吸附剂的制备[D];大连理工大学;2013年

【稿件标题】：[蛋白表达与纯化论文]HBoVVP1-U蛋白抗原的表达纯化
【作者单位】：北京大学深圳医院中心实验室;病毒基因工程国家重点实验室;贵州大学生命科学院;
【发表期刊期数】：《中国实验诊断学》2014年08期
【期刊简介】：《中国实验诊断学》杂志是由中华人民共和国新闻出版总署、正式批准公开发行的优秀期刊，中国实验诊断学杂志具有正规的双刊号，其中国内统一刊号：CN22-1257/R，国际刊号：ISSN1007-4287。中国实验诊断学杂志社由中华人民共和国教育部主管、主办，本刊为月刊。......更多中国实验诊断学杂志社(http://www.400qikan.com/qk/6974/)投稿信息
【版权所有人】：漆正宇；龚英浩；

更多医学类论文详细信息: [蛋白表达与纯化论文]HBoVVP1-U蛋白抗原的表达纯化
http://www.400qikan.com/lunwen/yixue/29179.html

相关专题： 《中国实验诊断学》相关期刊

推荐期刊：

国际汉语教育

珞珈管理评论

中国细胞生物学学报

湖南省社会主义学院学报

民族研究

中国卫生工程学

重庆交通大学学报

昆明医科大学学报

经营管理者

新闻战线

上一篇：数字化技术辅助下内固定三维重建:个性化方案修复髋臼骨折
下一篇：【四氯化碳肝损伤】丹参磷脂浸膏对急性四氯化碳肝损伤小鼠肝组织