本文作者：韩光杰；孙俊；李传明；刘琴；徐健；成功正常投稿发表论文到《江苏农业科学》2014年11期,引用请注明来源400期刊网！

【摘要】：研究苏云金芽孢杆菌原生质体制备与再生的最佳条件,为进一步提高原生质体转化率打下基础。通过酶解法对苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种工业生产菌株(Bacillusthuringiensisssp.kurstaki)2671原生质体的制备及再生条件进行了研究,考察了菌体生长状态、溶菌酶浓度、处理时间等影响因素,采用PEG法对大质粒进行原生质转化。结果表明,对数生长前期的菌体(培养3h),以SMML作渗透压稳定剂,溶菌酶浓度7mg/mL,40℃下酶解40min,原生质体生成量可达5.7×107个/mL,再生率可达14.1%。在此条件下,采用PEG法可将大质粒pLTV1-ep成功转化宿主菌,转化率为0.3CFU/μg。
【论文正文预览】：苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis,简称Bt)是使用最为广泛的生物农药[1]。目前,已经从Bt的不同亚种中分离了超过100种杀虫晶体蛋白[2-3],但每个亚种的致病力又极其有限。插入外源基因构建工程菌是提高其杀虫效果的有效方法之一。Bourgouin等将球形芽孢杆菌的毒素基因成
【文章分类号】：S482.39
【稿件关键词】：苏云金芽孢杆菌原生质体制备转化
【参考文献】:

• 唐雪明,邵蔚蓝,王正祥,方惠英,诸葛健;地衣芽孢杆菌感受态细胞的形成及高效电转化[J];生物技术;2002年04期
• 莫静燕;陈献忠;王正祥;;地衣芽孢杆菌原生质体的制备、再生及转化研究[J];生物技术;2009年05期
• 张义正,刘白玲,何先祺;影响枯草杆菌原生质体转化的因素[J];微生物学通报;1997年04期
• 李林,邵宗泽,喻子牛;电脉冲法转化苏云金芽孢杆菌BMB171的研究[J];微生物学通报;2000年05期
• 刘萍;夏立秋;胡胜标;严礼;丁学知;张友明;喻子牛;;外源基因在苏云金杆菌染色体上的定点整合及表达[J];微生物学报;2008年05期
• 韩璞;田洪涛;苑社强;郭红敏;郭兴华;罗云波;;罗伊氏乳杆菌原生质体的制备与再生条件的研究[J];中国食品学报;2010年01期
• 许鹏;张庆庆;汤文晶;吕闻闻;;复合诱变原生质体选育高抑菌活性纳豆菌[J];安徽工程大学学报;2011年04期
• 马建;魏益凡;厉志;王丕武;;植物RNA干扰表达载体构建方法的研究[J];安徽农业科学;2009年18期
• 刘雅琪;李明顺;喻子牛;;苏云金芽胞杆菌受体菌株的筛选及电转条件的优化[J];才智;2008年19期
• 黄天培;潘洁茹;李今煜;洪永聪;黄志鹏;;苏云金芽孢杆菌8010蛋白酶基因保守区克隆及序列分析[J];福建农林大学学报(自然科学版);2008年01期
• 杨瑞;张红梅;任永刚;周永国;李建粤;;反义蜡质基因不同整合位点对降低稻米直链淀粉含量的影响及整合位点分析[J];分子植物育种;2010年04期
• 周东坡,平文祥;细菌原生质体融合[J];齐齐哈尔师范学院学报(自然科学版);1987年02期
• 周东坡,平文祥,宋秀娟,徐颖琪,徐艳忠,王振人,郭德栋;细菌科间原生质体融合方法的研究[J];齐齐哈尔师范学院学报(自然科学版);1988年04期
• 平文祥,周东坡,曹忠俊,洪建中,李占营;枯草杆菌(B.subtilis)原生质体融合的方法学研究[J];齐齐哈尔师范学院学报(自然科学版);1989年03期
• 梁晋琼;柴桂珍;石晋虎;;枯草芽孢杆菌活菌制剂对牛羊细菌性腹泻预防和治疗效果的研究[J];中国畜牧兽医;2007年08期
• 朱宏莉,郭爱莲,宋纪蓉,杨秀芳,张嘉,张晓瑞;氦-氖激光诱变细菌细胞及原生质体选育果胶酶高产菌株[J];光子学报;2005年11期
• 潘洁茹;陈丽仙;黄天培;关雄;;荧光差异显示技术在Bt上的初步应用[A];2008年福建省科协第八届学术年会农业分会场论文集[C];2008年
• 沙莉;苏云金芽胞杆菌几丁质酶活性研究[D];福建农林大学;2011年
• 黄桂东;Lactobacillus brevis NCL912的耐酸特性及其酸胁迫下差异表达蛋白的研究[D];南昌大学;2011年
• 刘焕民;L-缬氨酸高产菌株的选育及其特性的初步研究[D];江南大学;2011年
• 彭勇;豆豉溶栓酶的纯化及其基因的克隆与表达研究[D];四川大学;2002年
• 郭长伟;万古霉素耐药模型的建立以及抗耐药菌化合物的分离[D];上海医药工业研究院;2003年
• 李林;苏云金芽胞杆菌高频转化系统的建立及其性能[D];华中农业大学;1999年
• 张琼;苏云金芽胞杆菌蛋白Aii及其对植物病原菌致病性的影响[D];华中农业大学;2001年
• 马向东;α-淀粉酶基因的克隆与体外诱变[D];华中农业大学;2001年
• 潘皎;短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）的碱性蛋白酶基因的表达研究[D];四川大学;2004年
• 张昕;植物病原拮抗细菌的发酵条件作用机制及定殖规律的研究[D];浙江大学;2005年
• 薛雯雯;CGA-N46基因在枯草杆菌中的多顺反子表达及表达条件优化[D];河南工业大学;2010年
• 袁丹丹;L-缬氨酸产生菌的选育及其发酵条件的调控[D];江南大学;2010年
• 漆叶琼;乳杆菌吸附苯并芘的特性研究[D];河北农业大学;2011年
• 黄春敏;整合基因扩增提高高温α-淀粉酶生产水平[D];江南大学;2011年
• 谢银珠;酸性普鲁兰酶异源表达的研究[D];江南大学;2011年
• 周翠;枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)活性物质的分离和功能测定[D];山东农业大学;2011年
• 吕娟;枯草芽孢杆菌lipA基因表达元件的修饰[D];天津大学;2010年
• 石婷;rocG基因与枯草芽孢杆菌氮代谢关系研究[D];天津大学;2010年
• 黄凯;转录调控因子CodY在苏云金芽胞杆菌中的作用研究[D];华中农业大学;2011年
• 江梦天;基于自溶素锚定的芽胞杆菌体内与体外活性展示系统的研究[D];华中农业大学;2011年
• 王奎明;王昌禄;陈铁涛;张虎成;陈薇;;乳酸菌食品级基因表达系统[J];安徽农业科学;2007年33期
• 刘白玲，何先祺，张义正;枯草杆菌中性蛋白酶基因的表达[J];皮革科学与工程;1995年03期
• 孙磊,孔文涛,孔健;乳酸乳球菌电转化条件的研究[J];山东大学学报(理学版);2005年03期
• 胡宏源,夏立秋,史红娟,孙运军,高必达,丁学知;苏云金芽孢杆菌伴孢晶体20kb DNA中cry1Ac基因的克隆、高效表达和生物活性研究[J];生物工程学报;2004年05期
• 贾士芳,王荫榆,郭兴华,还连栋;乳杆菌电转化条件的研究[J];生物工程学报;1998年04期
• 孙剑秋,周东坡;微生物原生质体技术[J];生物学通报;2002年07期
• 董金兰,张士文,王茜,李洪泉,刘国平;插入烟草叶绿体启动基因片段的重组质粒转化大肠杆菌和枯草杆菌感受态与原生质体的比较[J];微生物学通报;1990年01期
• 刘白玲，何先祺，张义正;杆菌属中蛋白酶基因的筛选及表达[J];微生物学通报;1994年01期
• 李扬，任改新;苏芸金杆菌cry基因的遗传学分析及基因工程进展[J];微生物学通报;1996年01期
• 刘伊强,王雅平,潘乃穟,陈章良;芽孢杆菌原生质体的形成、再生及种间融合的研究[J];微生物学报;1994年01期
• 姚江;苏云金芽孢杆菌及其在害虫防治上的应用(综述)[J];连云港师范高等专科学校学报;2002年01期
• 郭延奎,邵宗泽,喻子牛;苏云金芽孢杆菌工程菌芽孢形态发生的特征[J];电子显微学报;2003年04期
• 陈振民,李青,刘华梅,谢天键,曹军卫;苏云金芽孢杆菌发酵上清中增效物质生成的相关研究[J];微生物学通报;2004年01期
• 伍赠玲,黄天培,邱君志,李训波,关雄;一种改良的苏云金芽孢杆菌质粒DNA提取方法[J];福建农业大学学报;2004年02期
• 朱玮,赵兵,王晓东,王玉春;生物农药苏云金芽孢杆菌的研究进展[J];过程工程学报;2004年03期
• 刘正光;梁景乐;李恒俊;;苏云金芽孢杆菌生产菌种快速高效选育[J];莱阳农学院学报;2006年01期
• 孙翠霞;弓爱君;姚伟芳;邱丽娜;曹艳秋;;苏云金芽孢杆菌固态发酵培养基的优化[J];化学与生物工程;2006年08期
• 苏旭东;檀建新;张伟;林扬;;苏云金芽孢杆菌的分离与鉴定[J];安徽农业科学;2006年19期
• 孙翠霞;弓爱君;孔令芳;曹艳秋;;苏云金芽孢杆菌发酵技术研究进展[J];武夷科学;2006年00期
• 赵新民;夏立秋;王发祥;丁学知;孙运军;;重组杀蚊苏云金芽孢杆菌研究进展[J];中国生物防治;2007年01期
• 李荣森;戴顺英;李小刚;;我国土壤中的苏云金芽孢杆菌资源及其主要生物学特性[A];全国生物防治学术讨论会论文集[C];1991年
• 李今煜;陈聪;;苏云金芽孢杆菌发酵技术的研究现状[A];第四届全国绿色环保农药新技术、新产品交流会暨第三届生物农药研讨会论文集[C];2006年
• 張用梅;劉娥英;袁平;張令要;蔡全信;袁志明;;对夜蛾科害虫及蚊幼虫高毒力苏云金芽孢杆菌的分离及其特性[A];’98海峡两岸害虫生物防治学术研讨会论文摘要[C];1998年
• 李凤梅;李平;闫敏;郑爱萍;孙惠青;;苏云金芽孢杆菌的筛选和初步鉴定[A];首届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文摘要集[C];2002年
• 高梅影;戴顺英;彭可凡;;重组广谱苏云金芽孢杆菌工程菌生态安全性研究之一:工程菌的重组质粒向同生境中其它芽孢杆菌的转移[A];武汉市首届学术年会论文集[C];2004年
• 俞晓敏;黄天培;关雄;;苏云金芽孢杆菌冷激蛋白基因的克隆和序列分析(英文)[A];中国农业生物技术学会第三届会员代表大会暨学术交流会论文摘要集[C];2006年
• 张文飞;谢柳;张雪丽;方宣钧;;苏云金芽孢杆菌资源收集及其应用[A];海南生物技术研究与发展研讨会论文集[C];2006年
• 霍永良;蔡峻;陈月华;;固体培养的苏云金芽孢杆菌利于遗传转化[A];第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文集[C];2006年
• 朱育菁;蓝江林;陈璐;王秋红;葛慈斌;刘波;;苏云金芽孢杆菌在不同温度下脂肪酸变化的研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会论文集[C];2006年
• 吴继星;陈在佴;;苏云金芽孢杆菌“94001”菌株发酵工艺优化研究[A];第十届全国杀虫微生物学术研讨会暨全国生物农药与化学生物学研究与产业化会议论文摘要集[C];2006年
• ;生命因科学而富有[N];兵团日报(汉);2006年
• 程志新;高三全一册生物练习题[N];山西科技报;2003年
• 黄天培;苏云金芽孢杆菌的重要功能基因[D];福建农林大学;2006年
• 黄勤清;苏云金芽孢杆菌新助剂筛选及发酵因子优化[D];福建农林大学;2006年
• 黄必旺;苏云金芽孢杆菌的肠毒素及其安全性研究[D];福建农林大学;2005年
• 黄志鹏;苏云金芽孢杆菌WB9的研究[D];福建农林大学;2005年
• 张灵玲;苏云金芽孢杆菌LLP29菌株的分离及其对白纹伊蚊作用机理的研究[D];福建农林大学;2007年
• 姚江;高效广谱苏云金芽孢杆菌Ly30株的分子生物学研究[D];中国农业科学院;2002年
• 郎志宏;苏云金芽孢杆菌cry8Ca2基因的活性分析及在转基因烟草中的表达[D];中国农业科学院;2005年
• 郑毅;苏云金芽孢杆菌FS140菌株蛋白酶的研究[D];福建农林大学;2008年
• 吴燕榕;苏云金芽孢杆菌vip3A基因及杀虫防病工程菌研究[D];福建农林大学;2004年
• 张文飞;苏云金芽孢杆菌分离与新型cry基因资源的挖掘[D];广西大学;2011年
• 林琳;苏云金芽孢杆菌的分离和鉴定研究[D];黑龙江大学;2009年
• 李雪;苏云金芽孢杆菌的筛选与伴孢晶体编码基因的克隆与序列分析[D];齐齐哈尔大学;2012年
• 杨婧;1株苏云金芽孢杆菌的生物活性研究[D];辽宁师范大学;2011年
• 刘奇玮;家蚕对苏云金芽孢杆菌免疫反应的基因表达谱研究[D];江西农业大学;2012年
• 姚淑霞;海南热带雨林苏云金芽孢杆菌的分离及其两分离菌株的生物学特性鉴定[D];广西大学;2008年
• 马健华;若尔盖高原土壤芽孢杆菌遗传多样性研究及三株苏云金芽孢杆菌的特性分析[D];四川农业大学;2011年
• 宋健;大茂山苏云金芽孢杆菌的分离、鉴定及杀虫基因的克隆[D];河北大学;2011年
• 何献君;苏云金芽孢杆菌对菜青虫的防治技术研究[D];四川师范大学;2003年
• 代萌;苏云金芽孢杆菌菌株的分离鉴定及杀虫基因的克隆[D];河北农业大学;2013年
• 杨丽丽;苏云金芽孢杆菌和球形芽孢杆菌主要杀蚊毒蛋白的克隆及表达[D];黑龙江八一农垦大学;2014年

【稿件标题】：苏云金芽孢杆菌原生质体的制备及大质粒转化
【作者单位】：江苏里下河地区农业科学研究所;
【发表期刊期数】：《江苏农业科学》2014年11期
【期刊简介】：《江苏农业科学》杂志是由中华人民共和国新闻出版总署、正式批准公开发行的优秀期刊，江苏农业科学杂志具有正规的双刊号，其中国内统一刊号：CN32-1214/S，国际刊号：ISSN1002-1302。江苏农业科学杂志社由江苏省农业科学院主管、江苏省农业科学院主办，本刊为......更多江苏农业科学杂志社(http://www.400qikan.com/qk/6196/)投稿信息
【版权所有人】：韩光杰；孙俊；李传明；刘琴；徐健；

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