本文作者:王雷;崔震海;张立军;成功正常投稿发表论文到《江苏农业科学》2014年11期,引用请注明来源400期刊网!
【摘要】:以玉米自交系郑58基因组DNA为模板,设计了2对特异性引物,分别PCR扩增玉米C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)启动子及其全长编码序列,利用In-Fusion技术将两者定向克隆到载体pCAMBIA-1391Z上,并对重组子进行测序验证。结果表明,该PEPC启动子序列与GenBank中的玉米自交系B73的同源性为97.70%,片段长1200bp;全长编码序列同源性为97.90%,片段长6330bp。通过HindⅢ和EcoRⅠ酶切载体pCAMBIA-1391Z,利用In-Fusion技术将线性载体与之前获得的2个PCR片段连接,测序结果与预期序列一致,表明成功构建了pCAMBIA-1391Z-PEPC植物表达载体。对克隆和载体构建中存在的问题进行了讨论,以期为该类型基因的高效克隆及表达载体的构建提供参考、为C4型PEPC基因功能研究和C3植物遗传转化提供可用的基因序列。
【论文正文预览】:根据CO2固定初始产物的不同,可将高等植物分成C3、C4、CAM这3类。以三碳化合物3-磷酸甘油酸为最初光合产物的光合途径为C3途径(或卡尔文循环),以四碳化合物草酰乙酸为最初光合产物的光合途径为C4途径。C4途径具有CO2浓缩机制,能高效利用大气中的CO2,使植物保持较高的光合效率[
【文章分类号】:S513
【稿件关键词】:玉米PEPC基因克隆序列分析表达载体构建
【参考文献】:
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【稿件标题】:【基因表达载体的构建】玉米C_4型PEPC全长基因的克隆与表达载体构建
【作者单位】:沈阳农业大学生物科学技术学院/辽宁省植物基因工程技术研究中心;
【发表期刊期数】:《
江苏农业科学》2014年11期
【期刊简介】:《江苏农业科学》杂志是由中华人民共和国新闻出版总署、正式批准公开发行的优秀期刊,江苏农业科学杂志具有正规的双刊号,其中国内统一刊号:CN32-1214/S,国际刊号:ISSN1002-1302。江苏农业科学杂志社由江苏省农业科学院主管、江苏省农业科学院主办,本刊为......更多
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